Menin表达量对肿瘤细胞生长的影响及作用机制研究

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Menin 是基因 MEN1(multiple endocrine neoplasia type Ⅰ,MEN1)的表达产物,在内分泌组织高表达,该基因突变能引发多种内分泌腺体肿瘤。目前Menin的具体功能仍然不明确,揭示Menin功能对其引发的多种内分泌腺体肿瘤的治疗具有重要意义。论文研究了 Menin表达量对早期反应蛋白表达的影响和对小鼠黑色素瘤细胞,人肝癌细胞生长,凋亡,周期的影响。首先,构建重组质粒pLKO.1-shRNA-MEN1小鼠细胞感染载体(368,394,395,396,397五个不同的Menin shRNA序列分别插入该载体上),并对干扰载体进行慢病毒包装,收集病毒液侵染B16F1细胞干扰Menin的表达。他们的干扰效率由低到高依次是:Scramble、395、368、394、396、397。其次,构建pLKO.1-shRNA-MEN1人类细胞干扰载体(140、141、142、331四个不同的Menin shRNA序列分别插入该载体上),并对干扰载体进行慢病毒包装,收集病毒液,用病毒侵染HepG2细胞干扰Menin的表达,它们的干扰效率由低到高依次是Scramble、141、331、142、140。再次研究了 Menin表达量和不同激素(胰岛素、FSK)如何协同影响B16F1,HepG2细胞生长,细胞凋亡。最后研究了 Menin表达量对B16F1细胞周期的影响。结果表明:首先在B16F1中发现早期反应基因Egr1,JunD,C-myc,Fra2和C-Jun的表达量随着Menin表达量的降低而降低,而C-Fos的表达量随之升高。其次,敲低Menin表达可以抑制B16F1和HepG2细胞增殖且诱导细胞凋亡,insulin和FSK处理后可以缓解细胞增殖被抑制和细胞凋亡的现象。最后在B16F1细胞中敲低Menin表达使细胞周期阻滞于G0/G1期,缩短S期或G2/M期。
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