单甘油酯脂肪酶（Monoglyceride lipase，简称MGLP）是一类具有特殊底物专一性的脂肪酶，它们对脂肪酸的甘油三酯和甘油二酯没有水解效果，只对单甘油酯具有水解活性。由于单甘油酯脂肪酶的这一底物特异性，使其可以用于定向地制备功能性单甘油酯。但是，目前人们对单甘油酯脂肪酶的研究不多，对其结构功能关系更是知之甚少。论文以芽孢杆菌属H-257（Bacillus sp. Strain H-257）菌株来源的单甘油酯脂肪酶为研究对象，在原核生物体系中进行表达，对诱导温度，IPTG浓度等表达条件进行了优化，并对纯化后的MGLP进行酶学性质和催化应用进行了考察。实验结果如下：1.脂肪酶MGLP表达的最佳条件为：IPTG诱导终浓度为0.1mM，最适诱导温度-时间组合为30℃-8小时。同时利用CBD纯化系统纯化MGLP，3C蛋白酶进行酶切去掉CBD标签获得高纯度的MGLP酶液，为MGLP酶学性质做准备。2.脂肪酶MGLP的酶学性质：最适反应温度为60℃，分别于40℃、50℃、60℃温育3h后酶活仍保持稳定，70℃处理的样品有部分酶活损失；最适pH值为9.0，MGLP在偏碱性溶液中比较稳定，在pH8~9酸碱耐受性很好；经不同浓度有机溶剂处理1h的MGLP仍保持近90%的活性，说明MGLP具有很好的耐受有机溶剂的特性，且浓度越大，影响越大；非离子型表面活性剂（Triton X-100、Tween20、Tween80）对MGLP活性有微弱的抑制作用，浓度越高，抑制作用变化不大，而阴离子表面活性剂SDS对MGLP的活性有很强的抑制作用，随着SDS浓度的提高抑制作用明显增强；Ca2+处理酶液1h之后，MGLP的酶活基本没有变化，说明Ca2+不能提高MGLP的酶活，另几种重金属离子对MGLP的酶活都有一定的抑制作用。另外，根据有关参考文献MGLP在水解体系中对C8的脂肪酸选择性最高，所以选正辛酸和甘油为底物进行酯化体系优化，结果表明，最佳条件为：温度为50℃，加水量占底物的1%，加酶量150u/g，甘油和脂肪酸的底物摩尔比为5:1。在该体系下，以甘油和不同碳链的脂肪酸为底物进行催化酯化反应，MGLP对饱和脂肪酸具有特异的选择性，可以催化其发生反应，但催化酯化的活性较低，并且随着碳链的增长酯化率的大概趋势是下降的。根据此结果表明，MGLP对短碳链的脂肪酸选择性较高。3.对MGLP去除酯化产物中的单甘酯纯化甘油二酯方面的应用进行了考察，确定了脂肪酶MGLP催化水解辛酸甘油单酯的工艺条件。最佳催化水解的体系：加水量为90%，加酶量为500u/g，最适反应温度50℃。在该体系下，用脂肪酶MGLP催化水解辛酸甘油单酯，反应24h达平衡，单酯由最初的34.59%水解到5%。