【摘 要】
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背景:肝移植的成败很大程度上决定于供肝质量、缺血再灌注后的继发损伤和移植后排斥反应三个方面。细胞凋亡是移植肝缺血再灌注损伤的主要机制。在移植过程肝脏遭受的继发损害中,细胞凋亡伴随始终,其凋亡指数与损伤程度密切相关。在器官移植前,将外源性凋亡抑制基因转染入移植物,并表达功能性蛋白,可以抑制供肝的细胞凋亡,从而缓解免疫排斥反应,减轻手术后移植肝的缺血-再灌注损伤,对提高移植肝存活时间和功能改善等方面具
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背景:肝移植的成败很大程度上决定于供肝质量、缺血再灌注后的继发损伤和移植后排斥反应三个方面。细胞凋亡是移植肝缺血再灌注损伤的主要机制。在移植过程肝脏遭受的继发损害中,细胞凋亡伴随始终,其凋亡指数与损伤程度密切相关。在器官移植前,将外源性凋亡抑制基因转染入移植物,并表达功能性蛋白,可以抑制供肝的细胞凋亡,从而缓解免疫排斥反应,减轻手术后移植肝的缺血-再灌注损伤,对提高移植肝存活时间和功能改善等方面具有重要意义。有效的基因治疗方案需要将目的基因稳定、高效地转入移植物的实质和/或非实质细胞,并能产生功能蛋白。腺病毒载体能够转染处于非增殖期的实质细胞。尽管重组腺病毒载体介导的基因表达有一定的时限性,但是可以有效地减轻移植物术后早期的急性损伤（如缺血再灌注损伤）,从而是争取移植后良好结果的有效途径。第一部分:目的:用改良两袖套法建立稳定的大鼠原位肝脏移植模型。方法:结合实践,在取肝、受体麻醉、肝上下腔静脉的吻合、围手术期处理等几方面对传统的两袖套法进行改良,共施行大鼠原位肝移植动物实验150例,观察术后并发症及存活率。结果:经过150例次的训练,建立了稳定的大鼠原位肝脏移植模型。在实验的第三阶段,受体平均无肝期为13分钟,受体手术时间45分钟,手术成功率97%,两周存活率90%。结论:改良的两袖套法具有无肝期短、手术成功率高、大鼠术后存活时间长的优点,是大鼠原位肝移植的理想术式。第二部分:目的:构建重组腺病毒载体Ad.VSG-hBCL-2,将Bcl-2基因置于CMV启动子控制之下。方法:用酶切法将人Bcl-2基因的全长cDNA插入腺病毒穿梭质粒载体
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