目的:自身免疫性肝炎（Autoimmune Hepatitis,AIH）是一种慢性炎症性肝病,其特点是循环中自身抗体阳性和血清免疫球蛋白水平升高。研究发现,自身免疫性疾病中滤泡辅助性T细胞（Follicular helper T cells,Tfh细胞）和滤泡调节性T细胞（Follicular regulatory T cells,Tfr细胞）的比例失衡,导致大量的自身反应性B细胞的分化及致病性自身抗体的产生。本研究通过检测AIH患者及健康对照组外周血中Tfh、Tfr细胞的比例和外周血中IL-21的表达,并通过分析Tfh细胞比例改变对AIH患者脾脏生发中心反应和循环中浆细胞及记忆B细胞的影响,探讨Tfh和Tfr细胞的比例失衡在AIH发病中的潜在作用及其参与AIH发病中的具体机制。方法:1、收集于2018年1月-2018年9月在天津医科大学总医院消化科住院部就诊的AIH患者20例,所有受试者均未接受过药物治疗,并排除其他自身免疫性疾病和恶性肿瘤病史。健康对照组为15名来自体检中心,性别、年龄与AIH组相匹配的,既往无自身免疫性疾病或恶性肿瘤病史的查体者。收集各组受试者的静脉血,提取外周血单个核细胞（Peripheral blood monocular cell,PBMC）后,用流式细胞术（Flow cytometry）检测受试者外周血中Tfh细胞、Tfr细胞的比例并分析Tfh细胞与临床指标之间的相关性。RT-PCR分析AIH患者和健康对照组外周血中IL-21的表达情况。2、收集天津医科大学总医院病理科在2008年至2018年间纳入的自身免疫性肝炎肝硬化行脾切除术的患者6例和对照慢性肝病患者2例、外伤脾破裂患者2例,应用苏木精-伊红染色法和免疫荧光法观察各组患者生发中心的形态和CD4、CXCR5等蛋白的表达情况,并分析AIH患者脾切除术前后临床指标的改变。3、流式细胞术检测20名AIH患者和15名健康对照外周血中浆细胞和记忆B细胞的比例,分析AIH患者外周血中浆细胞、记忆B细胞与Tfh细胞及临床指标的相关性。结果:1.AIH患者循环中CD4⁺CXCR5⁺T细胞的比例为24.65±7.89,相比于健康对照组的（16.75±6.01）,比例显著增加（P<0.05）。其中,AIH患者外周血中CD4⁺CXCR5⁺PD-1⁺Tfh细胞的比例为3.26±0.85,比健康对照外周血中的（1.01±0.32）显著增加（p<0.001）;同时,AIH患者CD4⁺CXCR5⁺FOXP3⁺Tfr细胞(0.87±0.46比例较健康对照组（1.26±0.44）减少（P<0.05）。AIH患者外周血中CD4⁺CXCR5⁺PD-1⁺Tfh细胞与临床指标例相关性分析的结果表明,AIH患者的CD4⁺CXCR5⁺PD-1⁺Tfh细胞的数量与患者血清IgG呈正相关（r=0.6020,p=0.0174）,与ALT、AST、ALP、GGT及IgM无明显相关。RT-PCR分别检测7名AIH患者和5名健康对照组外周PBMC中Tfh细胞的主要细胞因子IL-21的相对表达量。结果表明,相比于健康查体者,AIH患者外周血中IL-21的表达水平增加（3.49±1.5 vs 0.98±0.39,P<0.01）。2.脾脏组织HE染色结果发现,AIH患者脾脏较乙肝肝硬化组和外伤脾破裂组生发中心体积增大,数目增多,形态不规则;同时,与外伤脾破裂患者相比,AIH肝硬化患者脾脏组织CD4⁺CXCR5⁺T细胞比例明显增加。AIH患者行脾切除后,血清IgG水平较术前明显下降,而ALT,AST,GGT,IgM等指标无明显差异。3.浆细胞和记忆B细胞的流式结果示,AIH患者外周血中CD19⁺CD27⁺CD38⁺⁺浆细胞的水平（3.08±1.2）显著高于健康对照组（1.39±0.61,P<0.01）;AIH患者外周血中的CD19⁺CD28⁺CD38^-/+记忆B细胞的比例为（26.91±4.85）,相比健康对照组（2.34±5.09）显著增加（P<0.001）。将AIH患者外周血中浆细胞和记忆B细胞的数目与CD4⁺CXCR5⁺PD-1⁺Tfh细胞的比例进行相关性分析,发现AIH患者外周血中的浆细胞和记忆B细胞均与Tfh细胞成正相关。临床指标的相关性分析结果显示,AIH患者外周血中的CD19⁺CD27⁺CD38⁺⁺浆细胞的数量与患者血清IgG（r=0.6393,p=0.0107）和IgM（r=0.5822,p=0.0228）呈正相关,而与ALT、AST、ALP和GGT无明显相关。结论:Tfh和Tfr细胞比例失衡通过导致脾脏生发中心反应的异常扩增,及促进浆细胞和记忆B细胞的过度分化参与AIH的发病。深入探索Tfh细胞和Tfr比例失衡的原因和关键靶点,可能为未来AIH治疗方法的研究提供新的方向。