转染HER-2/neu基因对子宫内膜癌细胞COX-2/PGE/P450arom信号通路的影响

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目的:
   利用基因转染技术,建立稳定转染,HER-2/neu基因高表达的Ishikawa细胞株,检测转染前后细胞株HER-2/neu、COX-2、P450arom蛋白的表达变化以及转染前后E2表达的变化,探讨HER-2/neu介导的COX-2/PGE2/P450arom信号通路在子宫内膜癌雌激素依赖中的作用机制。
   方法
   1、应用细胞培养技术对子宫内膜腺癌Ishikawa细胞株进行培养;
   2、利用基因转染技术建立稳定转染,HER-2/neu基因高表达的子宫内膜癌Ishikawa细胞株;
   3、Western-bloting方法检测转染前后细胞COX-2、P450arom蛋白的表达水平;
   4、ELISA方法检测转染前后细胞培养上清液中E2的含量;
   5、用SPSS统计软件对结果进行统计分析,并结合实验结果分析HER-2/neu对COX-2/PGE2/P450arom信号通路的调控作用,以探讨HER-2/neu在雌激素依赖性子宫内膜癌发生发展中的作用。
   结果
   1、建立稳定转染HER-2/neu基因的人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞,转染后HER-2/neu基因的表达增加(P<0.05);
   2、HER-2/neu基因表达增加(P<0.05)的同时COX-2、P450arom蛋白表达亦增加(P<0.05);
   3、HER-2/neu、COX-2、P450arom表达增加(P<0.05)的同时,E2表达亦增加(P<0.05)。
   结论
   子宫内膜癌Ishikawa细胞株HER-2/neu基因表达的增强进一步引起E2表达的增加,该结果可能通过调控COX-2/PGE2/P450arom信号通路的表达而实现的。
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