论文部分内容阅读
第一部分脑栓通对急性脑缺血后细胞凋亡的影响 目的：观察中药脑栓通的脑缺血保护作用及其机制。 材料和方法：140只雄性SD大鼠随机分为5组：假手术组(sham)、模型组(I/R)、脑栓通0.25g/kg/d、0.5g/kg/d、1g/kg/d剂量组(NST0.25、NST0.5、NST1)。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血损伤模型，1.5h后实施再灌注。采用TTC染色于缺血再灌注后24h计算脑梗死面积百分比；参照Zea Longa评分法于缺血再灌注后1、3、7、14d进行神经功能缺损评分；采用Nissl染色法观察缺血再灌注后1、3d的脑组织损伤；采用TUNEL法检测缺血再灌注后1、3d的细胞凋亡；采用western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、-8、-9的活化及Bax/Bcl-2的表达。 结果：0.5-1g/kg/d脑栓通能显著减少脑梗死面积百分比，改善神经功能缺损，减少细胞凋亡，抑制缺血后Bax表达上调和Bcl-2表达下调，从而调节Bax/Bcl-2表达比值，并抑制Caspase-3、-8、-9的活化。 结论：脑栓通可能通过抑制脑缺血后的细胞凋亡，减少脑梗死体积，促进神经功能的改善，机制与对Bax/Bcl-2比值的调节和对Caspase-8、-3的活化有关。 第二部分脑栓通对急性脑缺血后神经血管单元的影响 目的：观察中药脑栓通对急性脑缺血后神经血管单元的保护作用及其机制。 材料和方法：70只雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组(sham)、模型组(I/R)、1g/kg/d脑栓通组(NST1)、脑栓通+P13K抑制剂组(LY294002)。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血损伤模型，1.5h后实施再灌注。采用干湿重法检测脑含水量，依文思蓝渗出率检测血脑屏障通透性；采用免疫荧光(NeuN/GFAP)和TUNEL双染检测缺血再灌注后24h的神经元和星形胶质细胞凋亡；采用western blot检测凋亡相关蛋白PI3K/Akt信号通路的活化及BDNF、GDNF的表达；采用免疫荧光和免疫组织化学检测磷酸化Akt、BDNF以及GDNF的表达；采用TTC染色法于缺血再灌注后24h计算脑梗死面积百分比；参照ZeaLonga评分标准进行神经功能缺损评分。 结果：1g/kg/d脑栓通能显著减少缺血后神经元和星形胶质细胞的凋亡，减轻缺血引起的血脑屏障破坏，促进缺血后Akt的活化以及BDNF、GDNF的表达。采用PI3K抑制剂LY294002显著抑制NST对脑梗死面积百分比的减少，和神经功能缺损的改善。 结论：脑栓通可能通过上调BDNF、GDNF的表达，以及活化PI3K/Akt信号通路，从而促进缺血后的神经血管单元主要成分的存活和功能的维持。