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目的:①体外分离培养大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并观察其生物学特性;②应用损伤脑组织匀浆体外诱导MSCs向神经组织分化;③移植MSCs治疗外伤性颅脑损伤大鼠模型,观察其治疗效应;④观察MSCs移植对大鼠颅脑损伤后氧化应激反应和诱导型一氧化氮合酶表达的影响,探讨MSCs移植产生治疗效应的机制。 方法:①应用全骨髓贴壁法分离培养MSCs,观察其生物学特性;②应用损伤脑组织匀浆体外诱导MSCs分化成神经细胞,对分化后细胞进行免疫细胞化学染色鉴定;③采用Feeney自由落体方法制作大鼠外伤性颅脑损伤模型,经颈内动脉移植Brdu标记的MSCs;④采用神经系统疾病严重程度评分法评价大鼠的神经功能,并进行移植后大鼠脑组织的Brdu免疫组织化学检测;⑤分别检测实验组和对照组大鼠脑组织SOD、NOS、OH~-的含量以及iNOS的表达,并比较两组的差异。 结果:①应用贴壁筛选培养法体外可以培养出大鼠的MSCs,传至第6代时,可得到较为纯化的MSCs。传至20代左右,细胞仍能旺盛生长。MSCs在体外可长期培养扩增,其生物学特性稳定。②应用损伤脑组织匀浆诱导MSCs后,细胞形态变化明显,部分细胞出现突起并可见胞体呈锥样改变,在细胞生长密集处可见突起交织成网。免疫细胞染色结果显示NSE阳性表达率(23.2%±6.09%)要高于GFAP阳性表达率(14.3%+3.27%)。③经颈动脉移植2周后,MSCs可迁移并聚集于损伤组织区域边缘;与对照组比较,移植治疗的大鼠神经功能改善状况较好。④与对照组相比较,实验组大鼠脑组织内羟自由基的含量较低,其NOS的含量也较低,SOD的活性较高。iNOS检测表明MSCs移植可以抑制大鼠颅脑损伤后脑组织内iNOS的表达,表明细胞移植有保护神经元的作用。