研究背景和目的：瘤果黑种草的干燥种子作为药用部位，主产于中国新疆和云南地区，是维吾尔族的习用药材，维吾尔族名为“斯亚旦”，在《中华本草》记载其有抗肿瘤作用。到目前为止，专家们对黑种草籽进行的系统分离、分析研究，发现它除了富含挥发油和脂肪酸外，还含有黄酮类化合物、三萜皂苷类化合物和生物碱类化合物等。经国内外研究表明，百里香醌和α-常春藤苷为其主要的两大抗肿瘤活性成分，然而国内外关于Nigella A的抗肿瘤活性及其作用机制还不清楚。因此，本研究旨在分离出Nigella A并对其进行抗肿瘤活性的测定及其作用机制的初步研究。　　方法：1.利用反向硅胶，凝胶色谱等分离手段对黑子草籽的70％乙醇提取物进行了分离，从中得到了Nigella A，并对其进行水解，采用大孔树脂，凝胶色谱等分离手段得到Nigella B，通过其理化性质，化学反应和波谱手段(NMR)进行了结构鉴定。　　2.以人卵巢癌细胞株Sk-ov-3，人肺癌细胞株A549，人肝癌细胞株HepG2，人前列腺癌细胞株PC3，人结直肠腺癌细胞株Sw620，人宫颈癌细胞株Hela，人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为实验瘤株，采用MTT法测定Nigella A和NigellaB孵育不同时间段后细胞活力和细胞增值活性。并用SPSS17.0计算实验用化合物的IC50，比较Nigella A和Nigella B在不同的时间点对细胞的抑制作用。考虑到细胞的增殖速率和裸鼠移植瘤的成瘤率，所以选用Sw620进行体内实验。通过对裸鼠腋下接种人结直肠腺癌细胞株Sw620，构建裸鼠皮下移植瘤模型，通过每天口服和腹腔给药后隔天测定肿瘤体积和裸鼠重量，计算抑瘤率和相对增值率（T/C），并计算肝指数，脾指数;定期观察裸鼠的体重和行为变化，评价药物的毒性。　　3.体内裸鼠Nigella A给药结束后处死裸鼠，剖取肿瘤，并切取部分肿瘤组织提取蛋白，Western Blot测定7种蛋白因子Caspase-3，PARP，Akt，P-Akt，mTOR，P-mTOR及LC3Ⅱ变化;体外Nigella B孵育结肠癌细胞后，提取细胞总蛋白，Western Blot检测上述蛋白因子的变化。　　结果：1.从黑种草籽乙醇提取物中分离得到Nigella A，然后从Nigella A的水解产物中分离得到Nigella B，通过理化性质和波谱手段(NMR)确定了两个化合物的结构，分别为常春藤皂苷元-3-O-[β-D-吡喃木糖基(1→3)-α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖基]28-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)β-D-葡萄糖基(1→6)β-D-葡萄糖苷]，常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃木糖基(1→3)-α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷。　　2.Nigella A在体外无抗肿瘤活性，Nigella B在体外具有明显的抗肿瘤活性，其作用强度与浓度成正相关作用，且抑制作用会随着作用时间的延长而加大。同时Nigella B对细胞的抑制具有细胞依赖性，抑制效果从强到弱依次为Hela，PC3，Sw620，A549，MDA-MB-231，HepG2，Sk-ov-3。体内结果发现，Nigella A和Nigella B都具有抗肿瘤活性，但是Nigella B的毒副作用比Nigella A大。与模型组相比，NigellaA灌胃低，中，高剂量组和腹腔组的抑瘤率均有显著性差异(p＜0.05)且抑制率分别为40.78％，47.38％，53.04％，42.82％，Nigella B和环磷酰胺的抑瘤率分别为37.20％(p＜0.05)，54.87％(p＜0.05);各组的相对肿瘤增值率分别为70.36％(p＜0.05)，52.45％(p＜0.05)，39.72％(p＜0.05)，74.66％(p＜0.05)，76.58％(p＜0.05)，51.61％(p＜0.05);各组的脾指数，肝指数和模型组相比均无明显差异(p＞0.05)。　　3.Western blot结果显示Nigella A能使p-mTOR蛋白，pro-PARP蛋白表达量降低，同时使Caspase-3，p-Akt，cleaved-PARP，LC3Ⅱ的蛋白表达量增加，Akt蛋白和mTOR蛋白表达量基本不变。Nigella B体外蛋白表达和Nigella A体内蛋白表达基本一致，并呈量效关系。　　结论：1.通过对Nigella A体内机制的探讨，发现其抗结肠癌的作用机制可能是通过直接抑制mTOR，激活自噬通路产生抗肿瘤作用。此外，Nigella A增加了Caspase-3的蛋白表达，并使PARP发生剪切，使细胞发生凋亡从而产生抗肿瘤作用。由于直接抑制mTOR，一方面反馈性激活Akt，使p-Akt的表达增加，另一方面诱发了自噬，从而引起LC3Ⅱ的升高，与Nigella B体外机制基本一致。　　2.Nigella A在体外无抗肿瘤活性，但在体内却具有明显的抗肿瘤活性，经口服给药后未出现毒副作用;而Nigella B虽在体外具有显著的抗肿瘤效果，但在体内的疗效却不如Nigella A，且有一定的毒性。这些发现表明了Nigella A可能是一个前药，具有极大的经济价值。