辣椒(Capsicum annuum L.)在世界各地广泛栽培,是一种重要的蔬菜作物。辣椒为常异花授粉作物,天然杂交率高,通过自交分离选育纯系不仅耗时耗力,且效率较低。利用辣椒花药、小孢子培养技术不仅可快速获得纯系,缩短育种年限,提高育种效率,而且可以获得新的突变体,丰富种质材料。而到目前为止,辣椒花药、小孢子培养还未得到一种通用的有效获得单倍体和双单倍体的技术体系。本文以10种辣椒基因型为试材,对辣椒花药、小孢子培养影响因素进行了系统性研究,通过花药培养在基因型‘003’、‘065’、‘009’、‘081’、‘011’和‘046’中获得了胚状体和再生植株,进一步优化了辣椒花药培养体系；通过研究辣椒小孢子培养中影响小孢子游离纯化的各种因素,获得了一种较好的游离纯化小孢子的方法,为进一步研究辣椒小孢子培养胚状体诱导与植株再生奠定了基础。具体结果如下：1辣椒花药培养胚状体诱导与植株再生(1)辣椒花药小孢子发育时期与花器官官形态的相关性研究本研究以10份基因型材料为试材,分析辣椒小孢子发育时期与花器官官形态的相关性。结果表明：辣椒小孢子各发育时期与其花蕾的外部形态及花药的颜色密切相关。供试的十个基因型均为较大花蕾,萼片张开,花瓣与花萼等长或稍长于花萼,花药浅紫色部分占整个花药的1/4-1/3时,大部分辣椒小孢子处于单核靠边期。(2)辣椒花药培养胚状体诱导与植株再生影响因素的研究以10份不同基因型甜(辣)椒为试材进行花药培养,通过对基因型、取蕾时期、低温预处理、高温预培养、碳源及外源激素浓度配比等因素的研究,建立起有效的甜(辣)椒花药培养胚状体发生体系,并从6个基因型中获得了子叶形胚和再生植株。研究结果表明：基因型是限制甜(辣)椒花药培养诱导胚状体的关键因素,不同基因型间出胚率差异显著。获得胚状体的基因型中‘003’出胚率最高,为28.9%,‘046’为最低,仅为0.42%。处于盛花期的花蕾最适于甜(辣)椒花药培养。4℃低温预处理1～3d有利于胚状体的诱导,以处理2d的胚状体产率最高。以2%的麦芽糖代替3%的蔗糖能显著提高出胚率和子叶形胚的比率,筛选出适于甜(辣)椒花药培养胚状体诱导的最佳培养基为MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/LKT+2%麦芽糖,能有效地提高出胚率并促进植株再生。(3)辣椒花药培养再生植株的倍性鉴定以花药培养获得的9株再生植株为试材,利用根尖染色体鉴定其倍性。结果表明：基因型‘003,的3株再生植株均为单倍体；‘009’的2株再生植株中分别有1株单倍体和1株二倍体；‘065’和‘081’各2株再生植株均为二倍体。本试验采用的花药培养方法获得的再生植株中,单倍体占44.4%,是一种有效的获得单倍体植株的花培方法。2辣椒小孢子悬浮液的制备以‘003,、‘065’、‘009’、‘081’、‘011’、‘046’和‘336’为试材,研究了辣椒小孢子游离纯化及悬浮液制备方法,进一步研究影响辣椒小孢子培养因素。结果表明：取花瓣与萼片等长或稍长于萼片,淡紫色部分占整个花药的1/4-1/3的花蕾,消毒后于无菌条件下剥开花蕾取出花药。将花药置于50mL小烧杯中,加入适量提取液B5—13(B5+13%蔗糖),用玻璃棒挤压花药使小孢子释放出来。然后用孔径为37μm的细胞筛过滤,之后滤液在1000r/min的转速下离心5min,弃上清。重复离心3次,至上清无色透明。最后,用液体培养基NLN-9(NLN+9%蔗糖)悬浮小孢子,并用血球计数板调节小孢子浓度,即可得到适宜培养的小孢子悬浮液。