牦牛是青藏高原草地畜牧业的主体畜种,现有近1400万头,其养殖业的稳步健康及可持续发展对整个藏区经济发展起到重要的作用。牦牛产后子宫内膜炎时有发生,严重影响到牦牛的繁殖性能,给牦牛产业发展带来较大损失。引起子宫内膜炎的原因较多,其中病原菌感染是导致子宫内膜炎发生的主要原因。研究发现,大肠杆菌作为常见的革兰氏阴性致病菌之一,同样能够引起母畜子宫内膜炎,主要表现为大肠杆菌在子宫颈口开放的情况下,例如产后,很容易进入子宫,附着于子宫内膜上皮细胞上,经过一定时间的增殖及凋亡,会释放出大量的细菌毒素,从而引起子宫内膜炎症。当前,对子宫内膜炎症致病性毒素的研究热点之一为LPS（细菌脂多糖）。LPS是革兰氏阴性细菌凋亡后释放出来的主要致病性成分,该成分可直接作用于动物细胞,使细胞产生毒性反应,从而引起机体炎症反应,因此,LPS常被人们用于体外建立诱导炎症损伤模型时的首选。目前,在临床上子宫内膜炎症的治疗仍然以抗生素为主。然而,由于抗生素引起的耐药菌的传播和食品中抗生素残留等食品安全问题已成为世界范围内的关注热点,家畜养殖中抗生素的滥用问题逐渐被纠正。西藏一直以来都大力倡导绿色养殖。因此,在牦牛子宫内膜炎防治中,找到其他的治疗方法来代替抗生素、激素等现行的治疗药物也势在必行。为了找到更好的替代品,藏药材开始被人们广泛的研究和应用。红景天作为一种传统藏药,具有抗氧化、抗炎和抗菌等作用。在临床实践中可有效防治子宫内膜炎。为了验证由大花红景天中提取物红景天苷是否对牦牛子宫内膜炎症也具有一定的防治效果,本课题组开展了一系列试验,试验内容和结果如下:1、牦牛子宫内膜细胞体外纯培养,使用CK18进行子宫内膜上皮细胞鉴定。结果表明,细胞培养成功,纯度达到95%以上。2、用浓度为1、50、100、200、500、1000 ng/m L的LPS（细菌脂多糖）作用于子宫内膜细胞,采用MTT法检测细胞毒性,计算其对子宫内膜细胞生长的抑制率,以此确定最佳造模浓度。以此浓度干预子宫内膜细胞,观察IL-lβ和TNF-α的分泌变化情况,以观察此浓度是否有明显炎症反应。结果表明,LPS体外诱导牦牛子宫内膜炎症模型的最佳浓度为100 ng/m L,在此浓度下有明显的炎症过程。LPS诱导牦牛子宫内膜细胞产生炎症模型建立成功。3、为了探究红景天苷在炎症反应中的作用,试验中直接使用大肠杆菌对体外培养的牦牛子宫内膜细胞共同培养,模拟炎症过程,在此基础上设置对照组、E.coil组,E.coil+红景天苷组和E.coil+地塞米松组,共同孵育后,利用试剂盒测定各组超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）水平,同时采用ELISA测定子宫内膜上皮细胞培养上清液中TNF-α、IL-1α、IL-6和IL-10浓度。结果表明,大肠杆菌诱导的炎症组SOD活性降低、MDA水平升高。红景天苷和地塞米松预处理组子宫内膜上皮细胞可以提高细胞SOD活性、降低MDA水平。大肠杆菌处理组可显著增加细胞炎性因子TNF-α、IL-1α、IL-6和IL-10的产生,红景天苷和地塞米松治疗组可显著降低上述炎性因子的水平。说明,红景天苷对子宫内膜炎有一定的抗炎效果。4、为了初步研究红景天苷通过NF-κB和MAPKs信号通路调牦牛子宫内膜炎的作用机制,设置对照组、LPS对照组、LPS+DEX组、LPS+红景天苷组,24 h孵育后。IHC检测不同处理水平MPO活性;ELISA和q PCR检测信号通路相关因子NF-κB、TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-10、MCP-1 m RNA表达水平;Western Blot检测信号通路相关蛋白IκBα、p65、p38、EPK、JNK表达水平。MPO活性检测结果表明,红景天苷（20,40和80 ng/m L）可以略微提高牦牛子宫上皮细胞的细胞活力,但是差异不显著（P>0.05）。ELISA和q PCR检测结果表明,LPS组的相关因子的表达水平均升高。红景天苷可明显抑制这些因子的表达（P<0.05）,尤其是红景天苷浓度为80 ng/m L,最为接近地塞米松组和对照组。Western Blot检测结果表明,红景天苷和地塞米松治疗组中相关检测蛋白表达水平下降,红景天苷表现出能够显著抑制相关蛋白的表达提升。说明,红景天苷可以通过NF-κB和MAPKs信号通路,降低炎性因子水平,对牦牛子宫内膜损伤的治疗作用接近地塞米松的作用,可以被考虑用于治疗牦牛子宫内膜损伤。本研究为今后牦牛子宫内膜炎防治提供新的参考。