异种超急性和急性血管排斥反应免疫病理研究

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目的:研究慢病毒介导RNA干扰小鼠供心al,3GT、NF-κB表达后异种移植物的存活时间与免疫病理变化。方法:采用改良Heron技术套袖法建立小鼠到大鼠异种异位心脏移植模型(小鼠心脏移植到大鼠右侧颈部)。按照RNA干扰供心靶基因不同分组:对照组、空病毒组、RNAiα1,3GT组、RNAi NF-κB组、RNAα1,3GT+NF-κB组,每组8对。观察移植供心存活时间,并使用SABC法检测失功心脏补体C3、IgM、IgG、NK细胞、巨噬细胞、ICAM-1表达情况。结果:对照组、空病毒组、RNAiα1,3GT组、RNAiNF-κB组、RNAiα1,3GT+NF-κB组异种移植物的平均存活时间分别为(32±2.5)h,(31±2.5)h,(51±4.0)h,(31±1.8)h,(53±7.3)h.对照组、空病毒组、RNAiNF-κB组三组移植物生存时间无明显差别(p>0.05),RNAial,3GT组、RNAial,3GT+NF-κB组移植物生存时间较对照组、空病毒组、RNAiNF-κB组明显延长(p<0.05), RNAiα1,3GT组、RNAiα1,3GT+ NF-κB组两组移植物生存时间无明显差别(p>0.05)。SABC法检测补体C3、IgM、IgG在对照组、空病毒组、RNAi NF-κB组三组均可见大量沉积,且三组间无明显差别(p>0.05)。RNAiα1,3GT组、RNAiα1,3GT+NF-κB组补体C3、IgM、IgG沉积较对照组、空病毒组、RNAiNF-KB组减少(p<0.05), RNAiα1,3GT组、RNAiα1,3GT+NF-κB组两组间补体C3、IgM、IgG沉积无明显差别(p>0.05);NK细胞、巨噬细胞、ICAM-1在对照组、空病毒组、RNAiNF-KB组三组有阳性表达,且三组间无明显差别(p>0.05),在RNAiα1,3GT组、RNAiα1,3GT+NF-κB组浸润表达较对照组、空病毒组、RNAiNF-κB组增加(p<0.05),且RNAiα1,3GT+NF-κB组较RNAiα1,3GT组减少(p<0.05)。结论:异种抗原Galα(1,3)Gal在小鼠到大鼠异种心脏移植中起重要作用,RNAi可减少其表达使移植物存活时间延长,使异种移植物中补体C3、IgN、IgG沉积减少,巨噬细胞、自然杀伤细胞浸润增加,细胞间黏附分子-1表达增加,呈现为由HAR向AVR转变的趋势。小鼠到大鼠异种移植排斥具有HAR为主且与AVR共存的特点。RNAi NF-κB,可使移植物巨噬细胞、自然杀伤细胞浸润减少,细胞间黏附分子表达减低,可能减轻异种AVR反应。
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