【摘 要】
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玉米细菌性叶枯病菌作为造成严重农业经济损失的植物病菌之一。针对检测玉米细菌性叶枯病菌的方法主要有分子生物学检测法、血清检测法、分离培养检测法,但这些技术耗时较长,
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玉米细菌性叶枯病菌作为造成严重农业经济损失的植物病菌之一。针对检测玉米细菌性叶枯病菌的方法主要有分子生物学检测法、血清检测法、分离培养检测法,但这些技术耗时较长,需要相关的仪器和技术操作人员,非常不符合现场快速检测的要求。本文采用不同方法检测玉米细菌性叶枯病菌,主要结果如下:1.采用间接酶联免疫吸附法检测玉米细菌性叶枯病菌。检测玉米细菌性叶枯病菌检测限为1×106CFU/mL(Colony-Forming Units/mL)。2.通过生物素-亲和素酶联免疫吸附法检测玉米细菌性叶枯病菌,将单克隆抗体的特异性以及双抗夹心生物素-亲和素系统的放大作用结合起来,检测限为1×105CFU/mL,高于间接ELISA法1个数量级。3.采用的微波合成法,优化了合成40nm胶体金的条件;并利用制备好的胶体金,对抗玉米细菌性叶枯病菌单克隆抗体(4H4),优化了胶体金标记最适条件,确定了单克隆抗体的胶体金标记条件:最适pH值为8.0-8.5,最适标记量是24μ g/mL,合成了胶体金免疫探针。4.通过胶体金标记抗玉米细菌性叶枯病菌单克隆抗体4H4为检测抗体,用检测线上的玉米细菌性叶枯病菌单克隆抗体4G12作为捕获抗体,使用双抗体夹心检测方法,研制出了玉米细菌性叶枯病菌胶体金免疫层析试纸条。检测的玉米细菌性叶枯病菌检测限为1×106CFU/mL。
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