论文部分内容阅读
本文首先利用PCR-DGGE对渤海湾潮间带不同深度沉积物中的微生物群落构成进行研究。实验结果表明三个地区不同深度的沉积物中微生物的群落构成各不相同,柱状样各样品中含有17-29种微生物。相邻样品中的微生物群落的相似性系数比较高,一般都在50％以上。随着取样深度的增加,相邻样品相似性系数呈波浪式变化,不同样品中微生物的丰富度系数差异较大,而各样品中微生物群落的Shannon-wiener(H)变化不大。通过DGGE图谱发现,三个地区沉积物样品中含有4-11种不等基本微生物,它们存在于柱状样各个样品中的微生物群落中,50-100 cm样品中出现新的菌株的几率较大。
然后对天津新港地区的微生物群落进行了进一步的研究。在对渤海新港样品中细菌16S rDNA V3区特征片段进行DGGE分离、条带切割,克隆、测序后,进行BLAST比对和系统进化分析,结果表明天津新港潮间带沉积物中主要优势菌群主要是部分未培养的变形菌门(Proteobacteria)和其它一些环境样品中的未归类菌群；同时还发现许多条带序列与来自受不同污染的环境样品中的未培养细菌克隆具有较高的同源性(94％～100％),这些信息提示我们该区域受到不同类型污染物的污染,应道引起有关部门的重视本文还采用传统的分离纯化方法,从渤海湾潮间带沉积物样品中筛选能够降解多环芳烃的微生物,经过驯化筛选得到两株细菌P1和Y1,P1能够以芘为唯一碳源和能源,Y1能够以荧蒽为唯一碳源和能源,并对两株菌的特性进行了系统研究。实验结果发现P1为革兰氏阴性菌,最适温度为37℃,最适pH为5～10,对Cr6+、Zn2+、Pb2+、Cu2+、Cd2+5种金属具有一定抗性,对5种常见抗生素都较敏感；菌株Y1为革兰氏阴性菌,适合在低盐度(<1％NaCl)的环境中生长,最适pH为6—7,最适的生长温度为25-28℃,对Zn2+、Pb2+、Cu2+、Cd2+和低浓度的Cr6+均有抗性,但对高浓度的Cr6+十分敏感,Y1对卡那霉素、链霉素、氨苄青霉素和利福平具一定抗性,但对四环素较敏感。通过对菌株P1和Y1的16SrDNA测序和BLAST比对,并结合它们生理生化特性确定P1和Y1分别为芽胞杆菌属(Bacillus sp.)和Sediminibacterium sp.。P1在20 d内对芘的降解率高达62％,而Y1在10 d内对荧蒽的降解率最高达到18％。芘和荧蒽分别能激活P1和Y1的GST酶并诱导产生大量功能性蛋白参与多环芳烃的降解。本研究对渤海湾地区污染环境的微生物原位修复有重要意义。