环状RNA circACTN4促进乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的研究

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目的环状RNA(circ RNA)是近年来发现并且被科研人员广泛关注的一种非编码RNA(nc RNA),它们稳定、保守,表现出时空特异性,并且被认为参与了包括癌症在内的多种疾病的发展和进展。然而,circ RNA在乳腺癌中的作用和分子机制仍不清楚。该研究旨在探讨环状RNA circ ACTN4(hsa_circ_0050900)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法使用环状RNA芯片分析4对人乳腺癌组织和癌旁组织的circ RNA表达谱,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测了circ ACTN4的相对表达情况,包括了40对乳腺癌组织和癌旁组织和正常人乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7;将circ ACTN4过表达的质粒和对照质粒,分别转染乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7,并采用CCK8、Ed U、细胞划痕、平板克隆、Transwell迁移和侵袭等实验研究,探讨了circ ACTN4对乳腺癌细胞生长、转移和侵袭等方面能力的影响;蛋白质印迹法(western blot)和免疫组化实验检测circ ACTN4对CCND1(cyclin D1)、CCND2(cyclin D2)、CDK4(cyclin-dependent kinase 4)蛋白表达的影响;在裸鼠体内探讨circ ACTN4对移植瘤生长转移的影响。结果Circ ACTN4在人乳腺癌组织者中的表达明显高于人癌旁组织者,在乳腺癌细胞株中的表达则高于正常人乳腺上皮细胞。上调的circ ACTN4则能增强乳腺癌细胞生长、转移与侵袭,提高CCND1、CCND2和CDK4蛋白的表达。裸鼠移植瘤实验结果显示,上调的circ ACTN4能促使移植瘤的生长和转移,与对照组相比,过表达circ ACTN4组肿瘤的微血管密度值明显上升,肺转移的结节数量也显著增加。结论Circ ACTN4在乳腺癌组织和细胞中显著高表达,过表达的circ ACTN4能增强乳腺癌细胞的增殖、转移与侵袭能力,在体内也能促使裸鼠移植瘤的肿瘤生长和肿瘤转移,环状RNA circ ACTN4有望作为乳腺癌癌早期诊断和药物疗法的新靶点。
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