背景:《2020年全球癌症报告》显示,食管癌发病率在全球常见癌症中居第七位,是世界上第六大癌症相关死亡原因,仅次于乳腺癌、胃癌、肺癌、结肠癌和肝癌。全球每年食管癌病例约为50万例,其中食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）占80-90%。食管鳞癌通常累及食管中上部,在60-70岁的男性中更为常见。食管鳞癌是一种严重的致死性疾病,生存率很低。如果癌症早期发现,仅限于原发部位,五年生存率约为46%。如果癌症被诊断为晚期并且已经扩散,那么存活率将下降到约20%。半数以上的ESCC患者在发现时往往处于晚期转移阶段,预后不佳。转移是肿瘤的一个重要标志,是肿瘤发展过程中的关键步骤。巨噬细胞是肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）中的最丰富的免疫细胞。根据活化途径,巨噬细胞可分为M1和M2巨噬细胞。M1巨噬细胞具有促炎和抗肿瘤作用,它们杀死入侵的微生物和肿瘤细胞。M2巨噬细胞具有抗炎、促肿瘤和促组织修复作用。巨噬细胞具有高度可塑性,可以根据环境中的信号改变其表型。TME中,在细胞因子、因子和信号的作用下,M1型巨噬细胞被极化为M2型巨噬细胞。募集到TME中的巨噬细胞被称为肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAM）,其功能和表型与M2巨噬细胞相似。TAM在肿瘤进展和转移中发挥着重要作用。ESCC微环境中TAM的存在促进了ESCC的进展和转移。上皮-间质转化（Epithelial mesenchymal transition,EMT）是肿瘤转移的关键过程。TAM在促进癌症EMT方面具有重要作用。本研究旨在观察ESCC癌细胞与TAMs的相互作用以及TAMs促进食管鳞状细胞癌EMT和转移的机制。方法和材料:1.M1和M2巨噬细胞的诱导和鉴定通过与PMA一起孵育,THP-1细胞被诱导为M0巨噬细胞。然后通过将M0巨噬细胞与50ng/ml IFN-γ和100ng/ml LPS一起孵育将它们诱导为M1巨噬细胞,并且通过将M0巨噬细胞与50ng/ml IL-4一起孵育将它们诱导为M2巨噬细胞。在光学显微镜下观察M1和M2巨噬细胞的形态。通过使用免疫细胞化学鉴定M1巨噬细胞的CD16标记和M2巨噬细胞的CD163标记的表达来确定M1和M2巨噬细胞的表型。2.M1和M2巨噬细胞对KYSE 150细胞迁移能力的影响划痕实验和Transwell迁移实验检测各组KYSE 150细胞的迁移能力。3.M1和M2巨噬细胞影响KYSE 150细胞迁移能力的机制KYSE 150细胞分别与M1和M2巨噬细胞共培养,48小时后,Western blot检测Vimentin和E-cadherin的表达水平。KYSE 150细胞分别与M1和M2巨噬细胞共培养后,取各组上清液,ELISA法测定TGF-β1浓度水平。结果:1.M1和M2巨噬细胞的诱导和鉴定极化后的M0巨噬细胞形态,呈贴壁状、圆形或椭圆形,有伪足延伸。M1巨噬细胞呈不规则形状,扁平,有多个放射状触角,M2巨噬细胞呈细长或梭形,两端有胞质伪足。M2巨噬细胞中CD163标记阳性表达,M1巨噬细胞中CD16标记阳性表达。2.M2巨噬细胞可促进ESCC细胞的迁移能力划痕实验的结果表明M2巨噬细胞促进KYSE 150细胞的迁移,而M1巨噬细胞抑制KYSE 150细胞的迁移。Transwell迁移实验的结果与划痕实验结果一致。3.M2巨噬细胞可通过分泌TGF-β1诱导EMT,促进ESCC细胞的迁移能力与M2巨噬细胞共培养的KYSE 150细胞中E-cadherin的表达水平下调,Vimentin的表达水平上调,与M1巨噬细胞共培养的KYSE 150细胞中E-cadherin的表达水平上调,Vimentin的表达水平下调。与M2巨噬细胞共培养的KYSE 150细胞分泌TGF-β1的水平升高,与M1巨噬细胞共培养的KYSE 150细胞分泌TGF-β1的水平降低。结论:M2巨噬细胞通过分泌TGF-β1诱导EMT,促进食管鳞癌的转移,而M1巨噬细胞通过减少TGF-β1的分泌抑制EMT和食管鳞癌的转移。