论文部分内容阅读
目的：通过阻断AR,观察运动对骨骼肌ERK1/2通路和mTOR通路的影响特点,并通过阻断ERK1/2和mTOR通路,探讨在运动条件下ERK1/2通路和mTOR通路的关系。方法：实验一、二研究对象为7w龄SD雄性大鼠,随机分为安静对照组、AR阻断剂组、运动组、运动AR阻断剂组、假手术组。AR阻断剂干预组于颈部皮下包埋氟他胺缓释剂,运动干预组进行10d跑台运动(20 m/min,坡度10%,60min/d)。于末次运动后6h取趾长伸肌,测定其湿重、肌纤维横截面积、MHC含量以及AR、ERK1/2通路和mTOR通路信号分子的mRNA、蛋白及蛋白磷酸化表达。实验三将7w龄SD雄性大鼠随机分为安静对照组、DMSO组、mTOR阻断组、ERK1/2阻断组、mTOR+ERK1/2阻断组、运动组、运动mTOR阻断组、运动ERK1/2阻断组、运动+nTOR+ERKl/2阻断组。mTOR阻断干预组于运动前2h腹腔注射雷帕霉素,ERK1/2阻断干预组于运动前30min腹腔注射PD98059,连续注射10d。于末次运动后6h取趾长伸肌,测定其湿重、MHC含量以及AR、ERK1/2通路和mTOR通路信号分子的蛋白及其磷酸化表达。结果：(1)与安静对照组相比,AR阻断剂组趾长伸肌湿重、肌纤维横截面积、MHC含量及AR mRNA及磷酸化表达显著下降(p<0.01-0.05),MEK1/2、 ERK1/2、P90RSK mRNA及磷酸化表达未有显著变化,mTOR、P70S6K、4EBP1的mRNA、mTOR磷酸化表达、4EBP1及其磷酸化表达均显著下降(p<0.01-0.05)；运动组MHC含量, AR mRNA及磷酸化表达,MEK1/2、ERK1/2、P90RSK的mRNA及磷酸化表达,mTOR、P70S6K、4EBP1的mRNA, mTOR及其磷酸化表达,P70S6K磷酸化表达均显著增加(p<0.01-0.05)。运动AR阻断剂组与运动组相比,趾长伸肌湿重、肌纤维横截面积、MHC含量、AR mRNA及磷酸化表达、MEK1/2、 ERK1/2、P90RSK mRNA及磷酸化表达,mTOR、P70S6K、4EBP1的mRN A、磷酸化及蛋白表达均显著下降(p<0.01-0.05)。(2)与安静对照组相比,ERK1/2阻断组MEK1/2、ERK1/2的磷酸化表达及mTOR、P70S6K、4EBP1的磷酸化表达均显著下降(p<0.01-0.05)；mTOR阻断组mTOR、P70S6K、4EBP1的磷酸化表达显著下降(p<0.01-0.05),而MEK1/2的磷酸化表达增强(p<0.01)；mTOR+ERKl/2阻断组MEK1/2、ERK1/2、P90RSK的磷酸化表达和mTOR、P70S6K、4EBP1的磷酸化及蛋白表达均显著下降(p<0.01-0.05)。与运动组相比,运动ERK1/2阻断组ERK1/2、P90RSK的磷酸化表达和mTOR、P70S6K、4EBP1的磷酸化及蛋白表达显著下降(p<0.01-0.05)；运动mTOR阻断组mTOR、P70S6K、4EBP1的磷酸化及蛋白表达显著下降(p<0.01-0.05),而MEK1/2、ERK1/2、的磷酸化表达未有显著变化；运动_mTOR+ERK1/2阻断组MEK1/2、ERK1/2、P90RSK的磷酸化表达和mTOR、P70S6K、4EBP1的磷酸化及蛋白表达均显著下降(p<0.01)。结论：(1)运动经AR介导调控骨骼肌ERK1/2和mTOR通路,促进蛋白质合成。(2)本实验证实在运动条件下ERK1/2通路位于mTOR通路的上游,可正向调节mTOR通路的活性。