论文部分内容阅读
20世纪50年代当人们认识到蜂王浆天然的医疗保健作用以来，世界各国对蜂王浆的化学组成、药理作用进行了大量的研究。60年代后开展了对蜂王浆生产技术的大规模研究，而我国在此领域一直走在世界前列。目前，我国年产2000多吨蜂王浆占世界总产量的90％以上，这主要是由于以我国培育成功的蜂王浆高产蜂种为龙头的蜂王浆高产配套技术，使蜂王浆生产水平较10多年前提高10倍以上。它不但给养蜂业带来了一场产业革命，而且对人类健康事业起到了巨大的推动作用。然而，国内迄今为止外对我国特有的蜂王浆高产蜂种的遗传特征还没有进行深入的研究，因此，开展此领域的研究对蜜蜂种质资源的保护和合理开发利用、推动蜜蜂育种进程会起到积极的作用。 本研究采用微卫星DNA分析技术、基于混合线性模型的条件和非条件方差分析方法，对浙农大1号浆蜂（Ea）、本地意大利蜜蜂（Eb）、原种意大利蜜蜂（Ee）进行了分子遗传和数量遗传的研究。主要研究内容包括：微卫星DNA的等位基因频率、多态信息含量（PIC）、群体杂合度（h）、遗传距离、蜂王浆高产DNA标记分析；应用条件和非条件方差分析方法对蜂群产浆量、台浆量、台基接收率、咽下腺及蜂群繁殖力进行发育遗传研究，得出如下结论： 1．通过对10对荧光引物进行PCR扩增、图谱扫描和基因分型，在10个微卫星位点在Ea、Ee、Eb中扩增出2～15个等位基因不等，共扩增到96个等位基因，平均每个位点扩增9.6个，其中有48个（占总数的50％）等位基因在Ee、Eb和Ea中是不相同的，在Ea、Eb、Ee中分别发现6个、6个、12个特有等位基因；10个微卫星位点在3蜂种中共扩增到的等位基因数分别为75、61、66，平均每个位点的等位基因为7.5、6.1、6.6。表明微卫星DNA在3蜂种中存在较高的多态性（基因多样性），同时也说明Ea经过长期的地理隔离和人工选择，其遗传基础已与Ee和Eb发生了不同程度的改变。 2．本研究的10个微卫星位点在Ea、Ee、Eb中的平均PIC分别为0.57、0.53、0.57，均大于0.5，差异不显著。PIC是衡量片段多态性的指标，按照PIC的评判标准，10个微卫星位点均多态性良好，说明Ea与Ee和Eb一样具有高度的群体内遗传多样性。 3．群体基因杂合度的分析表明，Ea、Ee、Eb的杂合度分别为0.61、0.57、0.60。差异不显著。群体杂合度表示被检测的位点上群体中的杂合子频率。群体平均杂合度的高低反映了群体的遗传一致性程度，群体杂合度越低，表明该群体的遗传一致性越高，而群体的遗传变异越少，群体的遗传多样性越低。由此可见，Ea与Ee、Eb均具有较高的杂合度，此结果也表明，而Ea优良的产浆性能可能是较好地利用杂种优势。 4.品种之间的内氏遗传距离可较准确地反映群体间的亲缘关系，结果表明Ea与Eel旬的距离为0.25，Ea与Eb间的距离为0.16，Ee与Eb间的距离为0.14。由此可见，Ea和Ee间的亲缘关系较远，Ee和Eb以及Eb和Ea的亲缘关系较近。这一结果与Ea的进化史相一致。即Ea选自Eb，Eb来自Ee。 5.通过对10个微卫星位点等位基因频率的分析发现，在6个微卫星位点上7个等位基因频率在Ee、Eb、Ea中依次增加，3个微卫星位点的3个等位基因的频率在Ee、Eb、Ea依次降低，1个微卫星位点上的l个等位基因在Ee和Eb中频率较高，但Ea没有。即A29微卫星位点的159bp、A24的100bp和lo4bp、A7的llobp、A43的126bp、A14的22lbp和All3的22lbP在Ea中的频率分别显著或极显著高于Ee、Eb;而A43的14obp、AI一3的Z15bp、^14的Z19bP在Ea中的频率极显著和显著低于Ee、Eb，A24的一o6bp在Ee、Eb中的频率较高，但在Ea中为0。Ee、Eb、Ea属西方蜜蜂的同一亚种，即Ee引进我国后变为Eb，Ea是在Eb在群体中选育出来的蜂种，它们的生物学习性一致，但经人工选择后它们主要的差异在产浆量上，微卫星DNA分析已证明了Ea在遗传基础己经与Ee和Eb之间存在较大差异，采用条件和非条件方差分析方法己也证明了蜜蜂产浆性状的62%一89%由遗传因素决定、且Ea的产浆量极显著高于Ee和Eb，所以，不同位点的微卫星等位基因频率的差异可能与蜂种产浆量高低有关基因有紧密连锁的关系。囚此A29的159bP、A24的10obp和lo4bp、A7的110bp、A43的126bp、A14的22lbp不.1^113的22一bp可能是蜂王浆高产的微卫星DN^标记;A24的lo6bp、A43的14obp、AI 23的Z15bp、A14的219bp可能是蜂王浆低产的微卫星DNA标记。 6.采用条件及非条件遗传效应方差的统计分析方法，分析蜂群产浆量、台浆量、台基接受率3性状的遗传特征及成对性状之间的关系。结果表明蜂群产浆量、台浆量在各个时期均存在显著或极显著的基因型方差，台基接受率在大部分时期存在显著或极显著的基因型方差，说明这3性状主要由遗传因素决定。条件遗传分析发现，在某些无法检测到非条件方差的时期存在显著水平的条件方差，证明在产浆期的不同阶段，3性状都有基因的新表达;条件贡献率的分析表明，台浆量对产浆量的贡献率较台基接收率高。同一性状不同时期的遗传相关分析表明，蜂群产浆量以及台浆量在各个时期均检测到显著或极显著的基因型相关，台基接受率在大多时期存在显著的基因型相关，表明控制?