蛋白质在动物生命活动中起着重要作用。正常情况下,机体内的蛋白质时刻处于动态平衡中。一些养殖企业为了提高肉鸡的产出量,加大了蛋白质日粮的饲喂,导致肉鸡蛋白质摄取过量,引起肾脏受损。在肉鸡的饲养中,经常出现饲喂高蛋白饲料而产生疾病的情况,比如禽痛风等。本试验通过在基础日粮中添加不同含量的蛋白质,研究高蛋白日粮对肉鸡肾脏损伤的作用机理。选取120羽20日龄健康得白羽肉杂鸡,随机分为4组,每组30羽5个重复,每个重复6羽鸡。Ⅰ组饲喂基础日粮(蛋白质含19%),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组在基础日粮中添加豆粕使粗蛋白含量分别达到22%、25%和28%,试验鸡笼养,自由采食、自由饮水,试验期为14 d,试验期间,每天观察鸡的精神状况、食欲和排便情况,于试验第0、7、14 d从每组随机抽取5羽鸡经翅下静脉采血,3000 r·min-1离心10 min后分离血清,置于-20℃冰箱保存,用于肾功能指标及氧化与抗氧化功能检测。试验结束时,从各组随机抽取5羽鸡进行扑杀,立即无菌摘取肾脏,液氮速冻后置于-80℃保存,用于基因黄嘌呤氧化酶(ZOD)和Bcl-2 mRNA表达量的检测。另外,每组选取两羽,取肾脏分别固定于福尔马林和2.5%的戊二醛溶液中,用于观察肾组织的病理变化及超微结构。试验结果显示:1.在整个试验期间,对照组未表现临床发病症状,粪便正常,高蛋白日粮组鸡在试验的第8 d开始出现精神沉郁,喜卧,关节发热,食欲减少,拉白色稀粪,肛周潮湿等现象;其中高蛋白日粮Ⅲ组死亡1羽,死亡率3.3%,Ⅳ组死亡1羽,死亡率3.3%。剖检病死鸡,可见肾脏肿大,呈花斑样,肾实质和输尿管有尿酸盐沉积等病理变化,初步诊断鸡死亡于痛风。2.H·E染色观察,可见对照组肾组织结构完整且形状规则,无明显损伤;高蛋白日粮添加组,出现肾小球萎缩,肾小囊扩张,局部出现炎性灶,部分肾小管上皮细胞坏死脱离基底膜,有水肿的痕迹,部分管腔中有粉红色蛋白。透射电镜观察超微结构,可见对照组细胞结构正常,线粒体结构完整,形状分明,糖原含量丰富;高蛋白日粮组肾小管上皮细胞线粒体肿胀,部分线粒体嵴断裂。部分肾小管上皮细胞线粒体空泡变性,内质网肿胀。3.在第0、7和14 d时,肾功能指标分析,与对照组相比,第7d和第14d各高蛋白日粮组血清中钙(Ca)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)含量显著上升(P<0.01或P<0.05),血清中磷(P)、镁(Mg)含量变化不显著(P>0.05),第14d尿酸(UA)值呈显著性上升(P<0.05)。4.在第0、7和14d时,氧化与抗氧化指标分析,与对照组相比,第7d、第14 d各高蛋白日粮组血清中和第14 d各高蛋白日粮组肾组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、羟自由基(·OH)含量显著升高(P<0.01或P<0.05),第7d、第14 d各高蛋白日粮组血清中和第14 d各高蛋白日粮组肾组织中总抗氧力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P<0.01或P<0.05)。5.在14 d时,与对照组相比,各高蛋白日粮组肾组织XOD mRNA表达量极显著上升(P<0.01);各高蛋白日粮组肾组织Bcl-2mRNA表达量极显著上升(P<0.01)。综上所述,饲喂高蛋白日粮可造成肉鸡肾组织发生病变,血清肾功能相关指标出现异常,肾组织XOZD、Bcl-2 mRNA表达量显著升高,血清和肾组织氧化指标上升,抗氧化指标下降,出现氧化应激,导致肾脏损伤。