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茶多糖(Tea polysaccharides,TPS)是一种受到广泛关注的天然植物多糖,提取自茶叶,是继茶多酚之后的又一重要的功能性成分。大量的研究表明,茶多糖具有降血糖降血脂、增强免疫、抗肿瘤、治疗糖尿病等作用。茶多糖的结构分析和生物活性研究,具有品种、地区的差异性,江西省婺源绿茶作为中国绿茶的代表,闻名中外,产量高,品质佳,取材方便,本研究即选择婺源粗老绿茶为研究对象,通过水提、醇沉、Sevage法除蛋白、冻干等过程,最终得到纯度>95%的TPS。前期大量实验研究表明,TPS具有降血糖血脂、调节免疫、抗肿瘤等生物活性,在已有研究的基础上,运用现代分子生物学、免疫学的理论知识和技术,从细胞、分子、基因水平等方面,探讨TPS对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的免疫调节作用,为进一步了解TPS的免疫药理学作用提供理论依据。本研究的主要内容如下:以免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,探讨TPS在体外对巨噬细胞功能的影响。结果发现,能够显著地增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能;上调活性氧NO的分泌;提高细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平进一步利用RT-PCR和Western Blot技术从细胞因子mRNA水平、iNOS蛋白水平进行试验,探究TPS对细胞因子分泌水平和活性氧的释放是否在翻译、转录水平上进行调控的。RT-PCR法检测TPS刺激24 hr之后腹腔巨噬细胞内iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平,Western Blot法检测到iNOS蛋白表达显著增加,结果表明,TPS可以提高腹腔巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平,增加iNOS蛋白表达,从而表明TPS对腹腔巨噬细胞的活化作用,提示其对分泌iNOS、TNF-α、IL-1β的调节作用可能发生在基因转录和蛋白表达水平。以免疫抑制小鼠脾淋巴细胞为研究对象,探究TPS在体外对脾淋巴细胞免疫功能的影响。结果发现,TPS可以显著促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的体外增殖,还可与ConA共同发挥协同作用,促进T淋巴细胞的增殖,但对LPS诱导的B淋巴细胞的增殖无显著影响;TPS显著提高T淋巴细胞CD3+、CD4+的百分率,提高CD4+/CD8+的比值,从而抵抗环磷酰胺引起的免疫抑制;TPS可显著促进Th1细胞分泌细胞因子IL-2,Th2细胞分泌IL-4,还可促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞分泌NO的能力,这表明TPS具有调节免疫功能的作用。上述研究表明,TPS具有调节机体免疫的生物活性,对两大免疫细胞有显著的免疫调节作用,但是其具体的免疫调节机制还需进一步的研究。