目的:脂肪酸转运蛋白CD36对骨骼肌细胞摄取脂肪酸具有重要的促进和调控功能。但过量的脂肪酸供应会导致CD36在细胞膜上长期驻留,使细胞对脂肪酸的摄取增加,最终引发胰岛素抵抗。但是脂肪酸诱导CD36转位的机制还不清楚。本课题将以高脂饮食喂养的C57小鼠和棕榈酸诱导的L6骨骼肌细胞为模型,探讨在高脂条件下,骨骼肌细胞中调控CD36转位的分子机制。本课题的实施有助于我们进一步了解血脂异常导致胰岛素抵抗的发病机理,并可为药物开发与干涉治疗提供有价值的靶点。方法:通过高脂喂养C57小鼠和含有棕榈酸(PA)的培养基处理L6骨骼肌细胞,确定胰岛素抵抗发生的时间点;使用细胞膜蛋白分离方法分析蛋白在细胞膜上的分布情况;以荧光标记的能量底物检测细胞在不同条件下对葡萄糖和脂肪酸的摄取;通过化学阻断剂和shRNA转染研究相关蛋白的功能及相关激酶的上下游关系;以免疫荧光方法检测组织及细胞中蛋白的分布以及细胞骨架的形态变化;通过Western-blot检测组织和细胞中相关蛋白的表达、活性及分布。结果:高脂在引发胰岛素抵抗之前就可增加脂肪酸转运蛋白CD36在细胞膜上的分布。CD36结合细胞外的脂肪酸后可抑制细胞内Fyn的活性,导致LKB1由细胞核转移到细胞质中,激活位于细胞质中的AMPK。在PA引发的信号通路中,AMPK位于PKCζ上游并可激活PKCζ。活化后的PKCζ调控actin的结构,使之发生actin结构重塑,进而促进CD36向膜迁移。上膜后的CD36会介导细胞摄取更多的脂肪酸。本研究揭示了高脂通过CD36-Fyn-LKB1-AMPK-PKCζ-actin信号通路传导,使更多的CD36迁移到细胞膜上的分子机制。