【摘 要】
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目的：观察在永生型的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926细胞中有无功能性钙敏感受体(CaSR)的表达。 方法：(1)以永生型的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926细胞作为研究对象，采用Western b
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目的：观察在永生型的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926细胞中有无功能性钙敏感受体(CaSR)的表达。 方法：(1)以永生型的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926细胞作为研究对象，采用Western blot技术检测在EA.hy926细胞株中CaSR蛋白的表达。(2)采用免疫荧光技术检测在EA.hy926细胞株中CaSR蛋白的分布。(3)以新霉素(neomycin，CaSR的激动剂)及NPS2390(CaSR的抑制剂)以及一系列G蛋白-PLC-IP3信号通路的阻断剂，包括毒胡萝卜素(111印sigargin，TG，内质网钙泵的抑制剂)，U73122(PLC特异性抑制剂)，2-APB(IP3受体抑制剂)及咖啡因(canine，ER钙库耗竭剂)作为干预因素，通过激光共聚焦显微镜，检测细胞内钙([Ca2+]i)的变化。 结果：(1)CaSR在EA.hy926细胞株中有表达，且主要分布在胞膜和胞浆。(2)增加细胞外钙或者给予新霉素均可引起[Ca2+]i及CasR表达明显增加。(3)增加细胞外钙或者给予新霉素引起的这种[Ca2+]i的增加可被U73122(PLC的抑制剂)，2-APB(IP3受体的抑制剂)，caffeine(细胞内钙库耗竭剂)或毒胡萝卜素(TG，内质网钙泵的抑制剂)所抑制甚至取消。而U73343(U73122无活性的同型体)对这种细胞内钙的增加没有影响。 结论：本实验证明(1)在EA.hy26细胞株中存在CaSR的表达。(2)CaSR的活化可通过G蛋白-PLC-IP3通路介导细胞内钙增加。
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