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本论文研究的目的是对本实验室已经获得的具有草甘膦抗性的基因aroAM12和抗虫基因BtS1m的双抗转基因棉花的子代进行分子分析,同时对转基因棉花与非转基因棉花的性状作对比分析,以求获得基因稳定遗传和性状稳定的转基因棉花,为培育拥有我国自主知识产权的转基因棉花产品奠定基础。
实验室已通过基因重组的方法获得高抗草甘膦的基因aroAM12,利用此基因作为筛选标记将草甘瞵抗性基因和抗虫基因构建在一个载体中,并将其导入到棉花中获得了抗草甘膦抗虫双抗的转基因棉花,并进一步获得了种子。
本论文主要对本实验室获得的转基因棉花的种子进行培养基和田间种植的筛选,发现子一代转基因棉花抗性植株与非抗性植株的比例接近3:1,说明此草甘膦抗性基因的遗传遵循孟德尔遗传的定律。通过分子检测如PCR、Westernblot,离体叶片的抗草甘膦抗虫的检测和莽草酸含量的测定证明该抗性基因在棉花的子一代中稳定存在并得到了表达。通过对转基因棉花和野生型棉花的性状对比分析得到由于外源基因的导入使转基因棉花表现出较高的结桃数,衣分和衣指。这些性状都有利于棉花产量的提高。
通过对子一代种子的分析发现,筛选到的抗性植株明显增多,筛选到的抗性棉花在有草甘膦影响的情况下,侧根生长较非转基因棉花的明显增快,并获得了具有草甘膦抗性的子二代棉花植株。