第一部分烟曲霉感染时CEBPD和PTX3表达的变化目的:体内和体外实验探讨烟曲霉感染时CEBPD和PTX3的表达变化。方法:利用烟曲霉孢子刺激THP-1细胞和C57BL/6小鼠,检测CEBPD和PTX3蛋白表达变化;同时收集肺曲霉感染患者手术切除的肺组织蜡块,检测肺组织中CEBPD和PTX3蛋白表达;生物信息学数据库预测CEBPD在PTX3基因启动子序列中潜在的转录因子结合点。结果:（1）与正常对照组相比,烟曲霉孢子刺激后,THP-1细胞内CEBPD和PTX3蛋白表达均显著升高。（2）侵袭性肺曲霉病（Invaisve pulmonary aspergillosis,IPA）组小鼠肺组织结构破坏、出血,可见大量炎性细胞浸润,肺泡腔塌陷,PAS染色可以观察到烟曲霉孢子和菌丝。（3）IPA组小鼠与正常对照组小鼠相比较,肺组织中CEBPD和PTX3蛋白以及血浆和肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中PTX3表达显著升高。（4）免疫组化显示肺曲霉感染患者肺组织中CEBPD和PTX3表达较正常肺组织显著升高。（5）生物信息学结果预测PTX3启动子区域上存在CEBPD的结合位点。烟曲霉孢子感染的巨噬细胞m RNA测序结果显示,做为PTX3的转录子,CEBPD在曲霉感染中显著高表达。结论:体内和体外研究均显示,CEBPD和PTX3蛋白在烟曲霉感染中均显著增加。第二部分Hu R/CEBPD调控烟曲霉感染后PTX3的表达目的:探讨Hu R/CEBPD是否在曲霉感染过程中参与了PTX3表达的调控,并影响PTX3的免疫保护作用。方法:（1）通过si RNA敲降和慢病毒转染过表达细胞CEBPD后,检测Hu R、CEBPD和PTX3蛋白表达变化。（2）通过si RNA敲降和慢病毒转染过表达细胞中Hu R后,检测Hu R、CEBPD和PTX3蛋白表达变化。（3）激光共聚焦显微镜观察CEBPD和Hu R敲降或过表达后,巨噬细胞对烟曲霉孢子吞噬能力的变化。（4）使用染色质免疫共沉淀（Chromation immunoprecipitatation,Ch IP）方法检测CEBPD能否与PTX3启动子区域结合。（5）使用放线菌素D阻断转录,验证Hu R对CEBPD m RNA稳定性的影响。结果:（1）敲降或过表达CEBPD后,PTX3蛋白表达水平以及巨噬细胞吞噬孢子能力随之降低或升高,但Hu R表达没有发生明显改变。（2）敲降或过表达Hu R后,CEBPD和PTX3蛋白表达水平均随之降低或升高,同样的巨噬细胞吞噬孢子能力也随着降低或升高。（3）烟曲霉感染时,Hu R总表达量未发生改变,而细胞质中的表达量增加,并且敲降或过表达Hu R后,CEBPD m RNA的稳定性也随之降低或升高。（4）Ch IP显示烟曲霉感染时CEBPD确实能够与PTX3启动子区域结合。（5）Hu R过表达后CEBPD m RNA稳定性增加,相反的Hu R敲降后CEBPD m RNA稳定下降。结论:Hu R/CEBPD能够调控烟曲霉感染中PTX3的表达。Hu R通过核质转移机制提高CEBPD m RNA的稳定性来增加其表达,CEBPD通过结合PTX3基因启动子调控PTX3的表达,最终影响巨噬细胞对烟曲霉孢子的吞噬能力。第三部分肺泡灌洗液LFD检测非粒缺IPA的诊断价值目的:为了评估曲霉特异性LFD（later-flow device）检测对于诊断非粒缺IPA的价值。方法:收集非粒缺的IPA疑似患者的临床资料以及BALF,根据临床最终诊断,分为IPA组和对照组。我们对所有的136份BALF标本进行了LFD检测,对其中80份BALF标本进行了半乳甘露聚糖（Galactomannan,GM）检测。结果:（1）136例非粒缺IPA疑似病例,按照指南及临床诊治反应,最终诊断IPA 41例,作为研究组,其它疾病95例,作为对照组。（2）所有136例BALF样本中LFD诊断肺曲霉病的敏感性69.7%,特异性72.6%。（3）比较同时进行了BALF标本LFD和GM检测的80份样本结果,LFD的敏感性高于GM（78.8%vs 69.7%,P<0.05）,GM的特异性高于LFD（83.0%vs 70.20%,P<0.05）。（4）LFD和GM同时阳性的敏感性和特异性分别是60.6%和93.6%,LFD或GM其中一个阳性时的敏感性90.9%,特异性59.6%。结论:LFD检测是一种有前景的早期诊断非粒缺肺曲霉病的方法。