骨痿康颗粒对大鼠骨髓干细胞的动员作用及外周血VEGF、TGF-β、PDGF表达量的影响

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目的通过观察骨痿康颗粒对大鼠外周血中白细胞计数、单个核细胞计数、CD34~+细胞含量及VEGF、TGF-β、PDGF细胞生长因子表达量的影响,探讨骨痿康颗粒对大鼠骨髓干细胞的动员作用以及外周血细胞生长因子的表达影响,为下一步运用中药动员干细胞以及增加外周血细胞生长因子含量来达到无创性的治疗骨缺血坏死、骨缺损、骨不连等骨科疾病做前期的基础研究。方法SD大鼠60只,随机分为4组,每组15只。生理盐水组:生理盐水灌胃,同时皮下注射生理盐水;骨痿康颗粒组:骨痿康颗粒稀释剂灌胃,同时皮下注射生理盐水;粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)组(G-CSF组):生理盐水灌胃,同时皮下注射G-CSF;骨痿康颗粒+G-CSF(联合用药组):骨痿康颗粒稀释剂灌胃,同时皮下注射G-CSF;连续用药5天后,各组取大鼠外周血,检测计数大鼠外周血中白细胞计数和单个核细胞数量,流式细胞仪检测CD34~+细胞百分比,ELISA检测外周血VEGF、TGF-β、PDGF含量。结果用药5天后,生理盐水组、骨痿康颗粒组、G-CSF组以及骨痿康颗粒+G-CSF组外周血白细胞计数分别为(7.47±0.40)×10~9/L、(7.76±0.41)×10~9/L、(19.81±0.66)×10~9/L、(20.01±0.58)×10~9/L,骨痿康颗粒组白细胞计数与生理盐水组比较(P﹥0.01),G-CSF组白细胞计数与骨痿康颗粒+G-CSF组比较(P﹥0.01),G-CSF组以及骨痿康颗粒+G-CSF组外周血白细胞计数均高于生理盐水组(P﹤0.01);生理盐水组、骨痿康颗粒组、G-CSF组以及联合用药组外周血单个核细胞计数分别为(3.32±0.30)×10~9/L、(4.93±0.51)×10~9/L、(10.99±0.62)×10~9/L、(12.64±0.69)×10~9/L,其中,骨痿康颗粒组单个核细胞计数高于生理盐水组(P﹤0.01),G-CSF组单个核细胞计数高于骨痿康颗粒组(P﹤0.01),联合用药组高于G-CSF组(P﹤0.01);骨痿康颗粒组、G-CSF组以及联合用药组CD34~+细胞百分比为(0.78±0.04)%、(3.26±0.07)%、(3.90±0.08)%,均高于生理盐水组的(0.20±0.02)%(P﹤0.01),其中G-CSF组CD34~+细胞百分比高于骨痿康颗粒组(P﹤0.01),联合用药组CD34~+细胞百分比高于G-CSF组(P﹤0.01)。骨痿康颗粒组、G-CSF组和联合用药组的大鼠VEGF、TGF-β含量均高于生理盐水组(P﹤0.01),其中G-CSF组VEGF、TGF-β含量高于骨痿康颗粒组(P﹤0.01),联合用药组VEGF、TGF-β含量高于G-CSF组(P﹤0.01)。各组大鼠PDGF含量比较,骨痿康颗粒组和联合用药组PDGF含量高于生理盐水组(P﹤0.01),但是G-CSF组PDGF含量与生理盐水组比较无差异(P﹥0.01)。结论中药骨痿康颗粒对干细胞具有一定的动员作用,同时能够增加外周血VEGF、TGF-β、PDGF表达量,临床上骨痿康颗粒治疗骨缺血坏死等疾病的细胞学机制可能与此有关。骨痿康颗粒联合G-CSF对干细胞的动员效果最佳,并且能够在动员干细胞的同时,显著增加外周血中VEGF、TGF-β、PDGF含量。这提示我们在今后的研究中,可以更多的尝试将中药作为干细胞动员剂或辅助干细胞动员,在增加外周血干细胞数量的同时增加外周血中细胞生长因子的含量,为受损组织的修复提供充足的干细胞来源和生长因子条件。实验证明利用中药参与干细胞动员治疗骨科疾病在细胞学上具有可行性,具有研究意义。
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