外源硒对药食用真菌蛹虫草功能成分影响及富硒虫草产品应用研究

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本研究以新疆本地蛹虫草和普通奶粉为原料,建立新疆地区富硒蛹虫草菌种人工栽培技术,以及富硒虫草奶粉中虫草素、腺苷提取及检测方法。1.以Na2Se O3、Na2Se O4为外源硒,进行了不同浓度硒对新疆蛹虫草菌丝发育及子实体生长影响的试验。结果表明,低浓度外源硒促进了蛹虫草子实体的生长,而高浓度外源硒对子实体的生长起抑制作用。以Na2Se O3作为外源硒时,培养基中硒的适宜浓度为40 mg/L;以Na2Se O4作为外源硒时,培养基中硒的浓度不宜超过20 mg/L。2.采用UPLC法测定富硒虫草奶粉中虫草素和腺苷,分析了提取溶剂、净化剂等因素对测定的影响。色谱条件为ACQUITYUPLCBEH C18(2.1*100 mm,1.7μm)色谱柱,以甲醇和水为流动相,水为提取溶剂。样品以3000 r/min涡旋1 min后超声30 min,8000 r/min离心10 min,取上清液1 m L移至0.05 g SAX净化剂中;以3000 r/min涡旋1 min后静置10 min,取上清液过膜后上机分析。所建立的方法用于检测富硒虫草奶粉时,虫草素和腺苷的回收率分别为88.20%-99.00%和78.13%-93.37%。3.采用HPLC-MS/MS法测定富硒虫草奶粉中虫草素和腺苷,分析了提取溶剂、固相萃取小柱等因素对测定的影响。色谱条件为JADE-PAKCB-C18(2.1*150 mm,3.0μm)色谱柱,采用电喷雾正离子源(ESI+)、多重反应监测(MRM)模式进行测定,以甲醇和水为流动相,乙酸:乙腈:水(1:29:70,v/v/v)为提取溶剂。样品以3000 r/min涡旋1 min后超声15 min,8000 r/min离心10 min;取5 m L上清液过优选过的固相萃取小柱,加入5%的氨化甲醇后收集于试管,40℃氮气吹干,超纯水定容至1 m L,过膜后上机分析。所建立的方法用于检测富硒虫草奶粉时,腺苷和虫草素的回收率分别为73.45%-83.30%和72.42%-83.30%。以上研究结果为新疆地区人工栽培富硒蛹虫草以及富硒虫草奶粉的开发提供了重要参考。
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