细胞色素P450 2C9 (CYP2C9)是一种多态性酶,负责代谢许多临床药物,包括非甾体抗炎药、抗抑郁药、降糖药、心血管药物和口服抗凝剂。CYP2C9酶活性在不同人群中存在个体差异,主要是因为CYP2C9基因存在非同义单核苷酸多态性(SNPs)。CYP2C9*3和CYP2C9*13是存在于中国人群中最主要的两个突变等位基因,其分布频率分别为3.3%和1.02%。有文献报道,CYP2C9*3突变造成双氯芬酸代谢活性的降低,并且能够改变双氯芬酸与其他药物间发生药物药物相互作用(DDIs)的程度,从而引起带有该突变等位基因的个体发生潜在的药物不良反应(ADRs)。但是关于CYP2C9*13对双氯芬酸代谢的影响还没有很好的研究,并且对于该突变是否影响双氯芬酸和其他临床药物的相互作用未见报道。与CYP2C9*3在体内的大量研究不同,由于CYP2C9*13分布频率相对较低,携带有CYP2C9*13基因型的个体很难收集,这就使得对该突变的临床研究很受限制,因此,通过体外代谢数据预测CYP2C9*13引起的体内药代动力学变化是一项非常重要的研究工作。根据文献报道,关于CYP2C9基因多态性对各种药物代谢动力学影响的预测方法已成功建立,但是关于CYP2C9*13对不同药物的体外代谢数据报道较少,因此对于该突变的体内预测也未见报道。CYP2C9基因多态性能够显著影响CYP2C9介导的药物相互作用的程度。体外研究表明,CYP2C9*3能够改变许多临床药物对CYP2C9酶参与代谢其他药物的抑制潜能。体内研究表明,CYP2C9*3影响氟比洛芬和氟康唑的相互作用程度。到目前为止,关于CYP2C9*13对双氯芬酸与其他药物相互作用的影响未见报道。了解CYP2C9基因突变对药物间相互作用的影响,能够帮助携带有不同CYP2C9基因型的个体,在联合使用双氯芬酸和其他药物时,避免ADRs的发生。本研究通过CYP2C9.1(野生型)、CYP2C9.3和CYP2C9.13在酵母细胞中的表达,确定了这三个重组酶代谢双氯芬酸生成4’-羟基双氯芬酸的动力学参数。根据这些体外数据,我们预测了带有CYP2C9*3或CYP2C9*13基因型的个体对双氯芬酸口服清除率的比值(与野生型比值,CLoralR)。结果表明这些突变都不同程度地降低了双氯芬酸口服清除率。此外,我们探索了CYP2C9*3和CYP2C9*13对双氯芬酸与九种临床药物相互作用的影响,并将这些影响与野生型比较,结果表明,CYP2C9*3和CYP2C9*13能够不同程度地改变大部分药物(抑制剂)对CYP2C9酶代谢双氯芬酸的抑制程度,尤其是CYP2C9*13能够明显降低磺胺苯吡唑、氟伐他汀、氟伏沙明和反苯环丙胺的抑制能力。本研究结果为携带有CYP2C9*3和CYP2C9*13等位基因的个体在联合服用双氯芬酸与其他药物时,提供了可靠的理论指导。在基因分型的研究中,我们考察了74名中国人CYP2C9*3等位基因分布情况。采用聚合酶链式反应(PCR)—限制性片段长度多态性(RFLP)分析法检测74名中国人CYP2C9*3基因型,并且对PCR产物直接测序验证酶切结果的准确性。结果显示,有3例CYP2C9*3突变型杂合体,其余71例均为野生型纯合体,未检出CYP2C9*3突变型纯合体。测序结果证实该方法高效、特异、准确,可用于CYP2C9*3基因型分析。