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背景：
慢性牙周炎是常见的口腔疾病之一。复杂的微生物群落构成的菌斑生物膜，是引起牙周炎的首要因素，其病理表现为牙周组织中宿主免疫反应的失调，炎性细胞的聚集，破骨细胞的激活等，临床表现为牙龈出血、口腔异味、病理性牙周袋的形成，牙槽骨的吸收，重者可致牙齿的松动脱落，对生活质量产生较大影响。目前，在慢性牙周炎的研究中，促炎细胞因子在炎症性疾病中所发挥的作用，仍然是一个热门的研究方向。白介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）在慢性牙周炎中的作用也一直受到密切关注。
音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)信号通路是经典的信号通路之一，它在调控多细胞生物的发育过程中发挥着重要的作用，而此信号通路的异常激活，会导致正常细胞的凋亡，肿瘤细胞的增殖以及扩散，且对癌症患者的预后也有不利作用。有研究表明，Shh信号通路同样参与了炎症反应的发生和发展过程。课题组前期研究发现，在种植体周围炎患者的龈沟液中此信号通路的配体蛋白Shh的表达增高，提示此信号通路可能参与了种植体周围炎的炎症反应，而Shh在慢性牙周炎中的作用研究甚少。因此，本研究通过收集健康以及炎性牙龈组织后进行免疫组化染色，观察Shh在牙龈组织中是否存在着表达，分析Shh对慢性牙周炎的影响及其可能发挥的作用。
目的：
收集健康志愿者和牙周炎患者牙龈组织，通过免疫组化染色比较两组牙龈组中Shh、TNF-α和IL-6的表达水平，探究Shh,IL-6,TNF-α三种因子的表达水平与牙周临床指标的相关性，初步探讨在慢性牙周炎的发生发展过程中Shh可能起到的作用。
方法：
选取从2018年5月至2019年7月至郑州大学第一附属医院河南省口腔医院就诊的病人中选取80例符合纳入标准的研究对象，分为四组，每组各20例，分别为健康对照组，轻、中、重度慢性牙周炎组。记录每位患者姓名，年龄，性别，牙周探诊深度（Probe depth,PD）,临床附着丧失（Clinicalattachment loss,CAL），牙龈出血指数（Bleeding index,BI）以及菌斑指数（Plaque index,PLI）。用生理盐水将切取的牙龈组织冲洗干净，放入含有4%多聚甲醛的Eppendorf管中进行固定，最后石蜡包埋，切片染色观察。本实验通过HE染色和免疫组织化学染色，分析牙龈标本的组织病理学变化以及不同分组之间Shh,TNF-α和IL-6的表达差异。采用SPSS22.0对实验数据进行统计分析，P＜0.05时认为差异具有统计学意义。
结果：
1.HE染色结果示
（1）健康对照组：上皮钉突狭长，完整，上皮结构正常。固有层组织致密，炎症细胞不明显，胶原纤维在固有层中紧密排列。
（2）慢性牙周炎组：轻度慢性牙周炎组可见固有层内有少量炎症细胞浸润，中重度慢性牙周炎组上皮钉突紊乱，炎症细胞聚集在固有层，其中胶原纤维排列紊乱。
2.免疫组化染色结果示
免疫组化染色结果示，Shh、TNF-α和IL-6的表达水平在慢性牙周炎组中明显增高，而在健康对照组牙龈组织中三种因子仅有少量的表达，炎症组与健康对照组的表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）。在三组炎症组中，随着炎症程度的增加，Shh、TNF-α和IL-6的表达水平也随之增加，且三组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。
3.相关性分析：牙周探诊深度，临床附着丧失以及牙龈出血指数与Shh,IL-6,TNF-α均具有正相关关系。而Shh与IL-6、TNF-α之间无相关性
结论：
1.不同牙周状态下牙龈组织中Shh,TNF-α,IL-6的表达水平不同，随着炎症程度的增加，牙龈组织中Shh,TNF-α,IL-6的表达水平增高，因此表明，Shh信号通路参与了慢性牙周炎的发生发展过程。
2.牙周临床指标与Shh,IL-6,TNF-α均具有正相关关系,Shh可能成为判断慢性牙周炎发生发展的新的生化指标。
慢性牙周炎是常见的口腔疾病之一。复杂的微生物群落构成的菌斑生物膜，是引起牙周炎的首要因素，其病理表现为牙周组织中宿主免疫反应的失调，炎性细胞的聚集，破骨细胞的激活等，临床表现为牙龈出血、口腔异味、病理性牙周袋的形成，牙槽骨的吸收，重者可致牙齿的松动脱落，对生活质量产生较大影响。目前，在慢性牙周炎的研究中，促炎细胞因子在炎症性疾病中所发挥的作用，仍然是一个热门的研究方向。白介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）在慢性牙周炎中的作用也一直受到密切关注。
音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)信号通路是经典的信号通路之一，它在调控多细胞生物的发育过程中发挥着重要的作用，而此信号通路的异常激活，会导致正常细胞的凋亡，肿瘤细胞的增殖以及扩散，且对癌症患者的预后也有不利作用。有研究表明，Shh信号通路同样参与了炎症反应的发生和发展过程。课题组前期研究发现，在种植体周围炎患者的龈沟液中此信号通路的配体蛋白Shh的表达增高，提示此信号通路可能参与了种植体周围炎的炎症反应，而Shh在慢性牙周炎中的作用研究甚少。因此，本研究通过收集健康以及炎性牙龈组织后进行免疫组化染色，观察Shh在牙龈组织中是否存在着表达，分析Shh对慢性牙周炎的影响及其可能发挥的作用。
目的：
收集健康志愿者和牙周炎患者牙龈组织，通过免疫组化染色比较两组牙龈组中Shh、TNF-α和IL-6的表达水平，探究Shh,IL-6,TNF-α三种因子的表达水平与牙周临床指标的相关性，初步探讨在慢性牙周炎的发生发展过程中Shh可能起到的作用。
方法：
选取从2018年5月至2019年7月至郑州大学第一附属医院河南省口腔医院就诊的病人中选取80例符合纳入标准的研究对象，分为四组，每组各20例，分别为健康对照组，轻、中、重度慢性牙周炎组。记录每位患者姓名，年龄，性别，牙周探诊深度（Probe depth,PD）,临床附着丧失（Clinicalattachment loss,CAL），牙龈出血指数（Bleeding index,BI）以及菌斑指数（Plaque index,PLI）。用生理盐水将切取的牙龈组织冲洗干净，放入含有4%多聚甲醛的Eppendorf管中进行固定，最后石蜡包埋，切片染色观察。本实验通过HE染色和免疫组织化学染色，分析牙龈标本的组织病理学变化以及不同分组之间Shh,TNF-α和IL-6的表达差异。采用SPSS22.0对实验数据进行统计分析，P＜0.05时认为差异具有统计学意义。
结果：
1.HE染色结果示
（1）健康对照组：上皮钉突狭长，完整，上皮结构正常。固有层组织致密，炎症细胞不明显，胶原纤维在固有层中紧密排列。
（2）慢性牙周炎组：轻度慢性牙周炎组可见固有层内有少量炎症细胞浸润，中重度慢性牙周炎组上皮钉突紊乱，炎症细胞聚集在固有层，其中胶原纤维排列紊乱。
2.免疫组化染色结果示
免疫组化染色结果示，Shh、TNF-α和IL-6的表达水平在慢性牙周炎组中明显增高，而在健康对照组牙龈组织中三种因子仅有少量的表达，炎症组与健康对照组的表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）。在三组炎症组中，随着炎症程度的增加，Shh、TNF-α和IL-6的表达水平也随之增加，且三组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。
3.相关性分析：牙周探诊深度，临床附着丧失以及牙龈出血指数与Shh,IL-6,TNF-α均具有正相关关系。而Shh与IL-6、TNF-α之间无相关性
结论：
1.不同牙周状态下牙龈组织中Shh,TNF-α,IL-6的表达水平不同，随着炎症程度的增加，牙龈组织中Shh,TNF-α,IL-6的表达水平增高，因此表明，Shh信号通路参与了慢性牙周炎的发生发展过程。
2.牙周临床指标与Shh,IL-6,TNF-α均具有正相关关系,Shh可能成为判断慢性牙周炎发生发展的新的生化指标。