我国是一个养猪大国，但目前有多种传染病严重危害着我国养猪业的发展，影响了我国养猪业的发展和猪肉的对外贸易。因此，急需研制出安全、高效、新型的抗病毒和免疫增强剂用于增强猪体的抵抗力和提高现有疫苗的保护率。干扰素（Interferon，IFN）是动物机体感染病毒或接种疫苗后产生的一类具有抗病毒和免疫调节功能的蛋白质，是动物抵御病毒入侵的第一道防线。根据干扰素的氨基酸序列、抗原性和细胞来源的不同可将其分为2个型：Ⅰ型干扰素的主要成员为α干扰素和β干扰素，Ⅱ型干扰素为γ干扰素。Ⅰ型干扰素具有较强的抗病毒功能，Ⅱ型干扰素抗病毒功能稍弱，但免疫调节功能较强。人类重组干扰素用于治疗病毒感染和肿瘤疾病已有几十年的成功历史。近年来，猪干扰素（Porcine interferon，POIFN）的抗病毒和疫苗佐剂功能也在更多的试验中被发现和证实。本研究的目的就是应用基因工程和蛋白质工程技术研制出具有自主知识产权的重组猪α干扰素并研究其抗病毒和免疫佐剂功能，为我国重组猪干扰素的工程化生产及其在养猪业中的应用奠定基础。将猪α干扰素（PoIFNα）基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载体pPICZα-A中，电转化毕赤酵母X-33菌株，抗生素ZeocinTM浓度梯度筛选高抗性转化子，以PCR鉴定阳性重组菌株。筛选出的高拷贝重组菌株分别通过BMGY／BMMY培养，用甲醇诱导表达获得重组PoIFNα表达产物，经微量细胞病变抑制试验（MDBK-VSV系统）检测，表达产物的抗病毒活性为2×10⁶U／mL。为了探讨酵母表达的猪α干扰素的抗病毒活性，本研究试验了重组猪β干扰素在MDBK细胞、PK-15细胞和Marc-145细胞上对水疱性口炎病毒的抗病毒效价，同时探讨重组猪α干扰素对猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）和伪狂犬病毒（PRV）的抗病毒效果。结果显示，重组猪α干扰素在MDBK细胞上对VSV病毒的抗病毒效价最高，约为106.5U／mL，比重组猪α干扰素在Marc-145细胞和PK-15细胞上对VSV病毒的抗病毒效价要高100～1000倍，推测不同细胞上猪α干扰素受体的分布具有较大的差异。伪狂犬强毒株RA株和天然弱毒株Bartha株在1000U／mL猪。α干扰素处理的PK-15上的增殖均被显著抑制，病毒TCID₅₀下降约10倍，但强弱毒之间的敏感性没有明显差异。猪α干扰素对猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）和伪狂犬病毒（PRV）在细胞上的增殖具有显著的抑制效果，可使病毒TCID₅₀下降约100倍。PRRSVVR2332株和国内JS06分离株对猪α干扰素的敏感性没有明显差异。总之，重组猪α干扰素显示了良好的抗病毒活性。研究评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果。将酵母表达的PCV2 Cap蛋白浓缩后，配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗。试验仔猪分组后分别免疫铝胶亚单位疫苗和添加猪α干扰素的铝胶亚单位疫苗，同时设攻毒对照与空白对照，首免后21天加强免疫一次，二免疫后14天用PCV2 JS攻毒。铝胶Cap蛋白亚单位疫苗免疫猪体后产生了PCV2特异性中和抗体。添加猪α干扰素亚单位疫苗组仔猪免疫后产生的ELISA抗体和中和抗体显著高于铝胶亚单位疫苗组仔猪。攻毒对照组的4只仔猪攻毒后全都产生了病毒血症，并有较长时间的发热；铝胶亚单位疫苗组4头仔猪中只有1头仔猪产生病毒血症，添加猪α干扰素亚单位疫苗组的仔猪攻毒后都没有产生病毒血症。综合分析试验猪的病毒感染、临床表现和生产性能等情况表明Cap蛋白亚单位疫苗具有免疫保护效果，猪α干扰素可显著增强Cap蛋白亚单位疫苗接种仔猪的体液免疫反应，提高PCV-2 Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护效果。