全脊椎切除节段血管结扎、脊柱短缩对脊髓功能及组织病理学的影响

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:liongliong420
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[目的]:1.建立比格犬经后路L3全脊切除模型,全程监测体感诱发电位(Somatosensory evoked potential,SEP),分析结扎不同数量节段血管、阻断硬脊膜表面血管网、脊髓环周减压、不同脊髓短缩距离等对脊髓传导功能的影响。2.运用光镜、电镜观测不同实验阶段后脊髓组织病理学变化,初步揭示脊髓神经传导功能改变与脊髓神经细胞结构改变的关系。[方法]:比格犬42只,随机分为(A、B、C、D、E、F、G)七组,每组根据短缩距离再分为两个亚组(A1、B1、C1、D1、E1、F1、G1,短缩切除间隙1/3),(A2、B2、C2、D2、E2、F2、G2,短缩切除间隙2/3)每个亚组3只,运用SEP持续监测四肢脊髓神经传导功能。每一实验阶段监测至少30分钟,SEP波幅下降超过10%、潜伏期延长超过50%定义为脊髓损伤报警值,在建立L3全脊椎切除模型过程中,对实验动物组序贯性行以下实验条件干预:腰段节段血管结扎(A组:0×0 对、B 组:1×1 对、C 组:2><2 对、D 组:3><3 对、E 组:2><4 对、F 组:4×4对、G组:5×5对)、硬脊膜表面血管网阻断、脊髓环周减压、脊髓短缩(短缩距离为L3椎体高度加其上下椎间盘厚度)。实验干预条件完成后,切取腰3脊髓,脊髓组织切片进行脊髓结构光镜、电镜观察脊髓组织结构病理学变化。对不同实验组、不同干预阶段比格犬四肢SEP波幅(AMP)、潜伏期(LAT)数据进行比较,分析每个亚组在每一个干预阶段后脊髓神经传导功能的变化,当脊髓神经传导功能变化时脊髓神经细胞结构的变化。[结果]:1结扎节段血管:术前七组组内比较双下肢,组间SEP潜伏期、波幅改变无统计学意义(P>0.05)。与术前相比B、C两组分别结扎1对、2对节段血管后潜伏期均稍延迟、波幅稍降低,尚未达到脊髓损伤报警值,差异无统计学意义(P>0.05) , D组在结扎3对节段血管后潜伏期及波幅变化较B、C两组明显降低、延迟,但未达到脊髓损伤报警值,与术前基线相比变化具有统计学意义(P<0.05) ; E、F、G三组潜伏期及波幅变化明显,均达到脊髓损伤报警值,E、F、G三组与各组术前潜伏期、波幅相比变化差异有统计学意义(P<0.05)。2硬脊膜表面血管网阻断:与术前相比,A组SEP潜伏期稍延迟、波幅稍降低,变化差异无统计学意义(P>0.05) ; B、C、D三组在阻断硬脊膜表面血管网后SEP潜伏期及波幅与结扎节段血管后相比较变化有统计学意义(P<0.05),但均未达到脊髓损伤报警值;E、F、G三组在阻断硬脊膜表面血管网后较结扎节段血管后SEP潜伏期及波幅进一步降低、延迟,差异有统计学意义(P<0.05);B、C、D三组与各组结扎节段血管后SEP潜伏期、波幅比较变化有统计学意义(P<0.05),说明结扎≤3对节段血管并阻断硬脊膜表面血管网后潜伏期、波幅变化对脊髓功能有影响,但不会导致脊髓功能障碍。3脊髓环周减压:七组实验组SEP潜伏期及波幅较硬脊膜表面血管网阻断后均有恢复,潜伏期提前、波幅升高,A、B、C、D四组SEP波幅和潜伏期与硬脊膜表面血管网阻断后相比变化有统计学意义(P<0.05) , A、B、C三组波幅、潜伏期脊椎切除后与术前SEP信号相比变化无统计学意义(P>0.05),SEP恢复正常。与术前比较,D组波幅降低,变化有统计学意义(P<0.05),但潜伏期改变无统计学意义(P>0.05),在结扎节段血管≤3对时,行椎体切除后环周减压对脊髓神经传导功能有保护性作用,能恢复脊髓损害;E、F、G三组SEP潜伏期及波幅较硬脊膜表面血管网阻断后均有不同程度恢复,有统计学意义(P<0.05)但均未恢复到脊髓损害报警值水平以下,说明脊髓已经存在损害。4脊柱短缩切除间隙1/3: A1、B1、C1、D1、E1、F1、G1七个亚组在短缩切除后形成的间隙的1/3后,与术前相比:A1组波幅改变有统计学意义(P<0.05),但波幅较术前升高,潜伏期提前,改变无统计学意义(P>0.05),B1、C1、D1四组SEP信号基本恢复至术前水平,变化无统计学意义;E1、F1、G1三组SEP信号同样有恢复,但尚未恢复至脊髓损害报警值以下。说明短缩1/3时对脊髓神经传导功能有保护性作用。5脊髓短缩切除间隙2/3: A2、B2、C2、D2、E2、F2、G2七组在短缩椎体切除后形成的间隙的2/3后,A2、B2、C2、D2四组实验组SEP较环周减压后潜伏期明显延迟,波幅有明显降低,均达到了脊髓损伤报警值,改变有统计学意义(P<0.05) ; E2、F2、G2三组短缩2/3后SEP较环周减压后波幅进一步降低、潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05)均达到了脊髓损伤报警值。6短缩后A、B、C、D、E、F、G七组均行脊髓取材,在光学显微镜、透视电镜下检测脊髓神经细胞组织结构改变。当结扎≥4对节段血管时光学显微镜下可以观察到,脊髓中央管周围出血坏死,中央管破裂变形;通过透视电镜观察到,可见细胞线粒体肿胀明显,粗面内质网数目明显减少,染色质边集成块,细胞坏死。当短缩2/3时,光学显微镜下可观察到,脊髓中央大片出血和坏死,部分组织液化。透视电镜下可观察到,坏死神经元细胞明显增多。[结论]:1.结扎节段血管≤3对时,脊髓神经传导功能正常;结扎≥4对时,脊髓神经传导功能障碍,且脊髓传导功能随着结扎节段血管数量的增加而变差。2.阻断硬脊膜表面血管网会对脊髓神经传导功能造成影响;在已结扎≥4节段血管犬模型中,阻断硬脊膜表面血管网将会进一步损伤脊髓神经传导功能。3.犬腰3全脊椎切除脊髓环周减压,对脊髓神经传导功能起到保护性作用。4.脊柱短缩≤1/3切除间隙时,对脊髓神经传导功能起到保护性作用;短缩≥2/3切除间隙时,将可能导致脊髓神经传导功能障碍。5.脊髓神经传导功能与脊髓组织病理学变化存在明显的相关性,SEP对脊髓损伤很敏感,能够客观的反应出脊髓神经的传导功能。
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