目的:探讨lncRNA H19在BMP9诱导的MSCs成骨和血管形成过程中的作用和相关机制,为构建基于BMP9的组织工程骨提供理论和实验依据。方法:运用AdEasy重组腺病毒系统成功构建AdGFP,AdBMP9,AdsimH19等重组腺病毒,使用HEK293(Human embryonic kidney)细胞体外扩增腺病毒,体外培养永生化小鼠胚胎成纤维(Immortalized mouse embryonic fibroblast,iMEFs)细胞并添加腺病毒,分为AdGFP,AdBMP9,AdBMP9+AdsimH19等3组。iMEFs细胞成功转染上腺病毒后,分别于3d、5d、7d三个时间点提取蛋白和mRNA进行Western blot和qPCR实验,检测成骨、成血管分化相关分子标志物表达及血管生成关键调控通路Notch信号的表达情况;iMEFs细胞成功转染上腺病毒后3d和5d送样进行流式细胞学分析,检测血管内皮细胞分子标志的表达情况;选取2周左右的健康雄性裸鼠6只,并将其分为AdGFP,AdBMP9,AdBMP9+AdsimH19三组。其中AdGFP组1只,AdBMP9组3只,AdBMP9+AdsimH19组2只,将成功感染上腺病毒的iMEFs细胞悬液注射入裸鼠皮下,细胞量大约为10~6个/100ul,分别于3w、4w、5w在麻醉状态下处死裸鼠并收取皮下异位成骨包块,其中4w只收取AdBMP9组的成骨包块。收取的成骨包块全部行microCT扫描;扫描完毕后所有成骨包块进行石蜡包埋并切片处理,石蜡切片进行HE染色和免疫组织化学染色,显微镜下观察并采集图像进行分析。结果:BMP9能够促进干细胞的成骨分化,同时明显上调成血管信号关键启动因子VEGFa和血管内皮细胞分子标志物CD31在mRNA和蛋白水平的表达;沉默H19导致BMP9诱导的异位成骨骨体积下降,同时明显下调成血管信号关键启动因子VEGFa和血管内皮细胞分子标志物CD31在蛋白水平的表达;沉默H19下调Notch信号通路胞内段NICD1和下游靶基因Hey1、Hey2、Hes7在mRNA水平的表达,其中NICD1和Hey1表达的下降具有统计学意义。结论:BMP9同时具有诱导MSCs成骨分化和血管形成的能力,且血管形成伴随BMP9诱导的骨形成;lncRNA H19通过血管形成信号调控BMP9诱导的干细胞成骨分化;Notch通路参与lncRNA H19对BMP9诱导的MSCs成骨分化、血管形成的调控。