本文以卤虫无节幼体为模式生物建立了一种新的杀虫活性生物测定方法。通过测定卤虫对不同杀虫剂的敏感性,探讨了卤虫作为杀虫生物活性筛选模型的可行性;通过研究不同因素对生物测定结果的影响,建立了以卤虫为生物模型的杀虫活性快速筛选方法;应用所建立的卤虫生物测定法对62种竹提取物进行了杀虫活性筛选,并与传统的蚜虫生物测定结果进行了比较分析,对卤虫生物活性筛选模型的准确性进行了验证。研究结果如下:1.卤虫对常用杀虫剂的敏感性测定结果表明:卤虫Ⅱ~Ⅲ期无节幼体(接触杀虫剂24h~48h)对杀虫活性物质最为敏感,而且卤虫对不同种类杀虫剂的敏感性存在差异,除对杀虫单和灭多威敏感性较差外,对其它供试杀虫剂均表现出较高的敏感性。其中,阿维菌素、氟铃脲等对卤虫48h的LC50为0.02mg/L、0.023mg/L,三唑磷、哒螨灵、毒死蜱、氟虫腈等48h的LC50为0.58mg/L、0.72mg/L、1.04mg/L、5.97mg/L,西维因、杀虫环、敌敌畏、杀螟丹、速灭威、溴氰菊酯等48h的LC50为17.48mg/L、18.12mg/L、24.69mg/L、26.91mg/L、30.90mg/L、33.33mg/L,而杀虫单和灭多威48h的LC50分别为443.37mg/L、535.91mg/L。可以看出,卤虫无节幼体对大多数化学杀虫剂均表现出较高的敏感性,能够作为杀虫活性物质筛选的生物模型。2.不同因素对卤虫生物测定结果影响的研究表明:卤虫无节幼体培养溶液的盐度、pH值、有机溶剂、培养温度、光照周期等因素都会影响到卤虫生物测定的结果。当人工海水盐度为1‰时,卤虫存活率仅为5.03%,而在清水中无一存活;培养溶液pH为4.5时,卤虫存活率为28.86%,pH为3时,卤虫无一存活;温度高于35℃会影响到卤虫的存活率,40℃时,为30.63%,温度升至45℃时,卤虫存活率降为2.06%;试验过程中,过长的光照周期也会影响到卤虫的存活,持续光照时,卤虫存活率只有75.57%;乙酸乙酯、乙腈等有机溶剂对卤虫无节幼体毒性较大,1%浓度下,卤虫存活率为22.6%、7.35%,而在1%正己烷、二氯甲烷、石油醚、甲苯、苯等存在下,卤虫无一存活。另外,待测溶液体积的大小不会对卤虫的存活率产生影响,试验过程中可取中间量1.5mL。在上述研究的基础上,确立了卤虫生物测定方法:培养卤虫无节幼体的海水盐度范围应在5‰～120‰,温度可控制在10℃～35℃,pH范围为5～10,光照周期不宜超过18L-6D,待测物质可用丙酮、甲醇、乙醇的等有机溶剂溶解,有机溶剂浓度可控制在1%以下,将卤虫和1.5mL待测液加入到24孔培养板内培养,48h后,体式显微镜下观察卤虫死亡个体数及试虫总数,计算死亡率,评价待测液的杀虫生物活性。3.利用卤虫生物测定法对62种竹叶丙酮提取物进行了杀虫活性筛选。结果表明,供试浓度为1.0g/L的竹提取物对卤虫无节幼体的杀虫生物活性差异很大。生物活性较好的有方竹、苦竹、绿竹、观音竹、毛竹、水竹、橄榄竹、短穗竹等8种提取物,卤虫死亡率分别为100%、97.82%、93.11%、92.14%、86.43%、84.80%、84.79%、75.10%,对卤虫48h的LC50分别为:144.2mg/L、323.9mg/L、388.6mg/L、399.1mg/L、436.9mg/L、474.7mg/L、565.6mg/L、631.8mg/L;鹅毛竹等19种竹提取物作用下,卤虫的死亡率在40%～70%;粉单竹等14种竹提取物作用下,卤虫的死亡率在20%～40%;寿竹等21种竹提取物作用下,卤虫的死亡率不足20%,其中尖头青竹、银丝竹、篱竹、箬竹、花吊丝竹等5种竹提取物对卤虫无生物活性。4.为验证卤虫生物活性筛选模型的准确性,以蚜虫为供试生物模型,采用传统浸渍法对62种竹提取物的杀虫生物活性进行了测定。结果表明:生物活性较好的有方竹、苦竹、绿竹、毛竹、观音竹等5种竹提取物,蚜虫72h死亡率为86.25%、81.25%、80%、78.75%、74.5%;水竹等8种竹提取物作用下,蚜虫的死亡率在40%～70%;菲白竹等11种竹提取物作用下,蚜虫的死亡率在20%～40%;黄间金碧玉竹等38种竹提取物作用下,蚜虫的死亡率不足20%,其中尖头青竹、银丝竹、硬头黄竹、篱竹、花吊丝竹等5种竹提取物对蚜虫没有生物活性。可见,两种方法的筛选结果大体趋势一致,对卤虫活性高的竹提取物对蚜虫也表现出较好的生物活性,对卤虫活性低的,对蚜虫效果也比较差,而且绝大部分竹提取物对卤虫的活性明显高于蚜虫,证明利用卤虫生物活性筛选模型筛选杀虫活性物质是可靠的。卤虫作为杀虫活性测定的模型生物具有来源广泛、操作简单、耗时短、所需化合物的量较少等优势。作为一种成本低、效率高的生物测定方法,卤虫可大大提高筛选效率,对新农药的研发具有重要意义。