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18株来自不同红树体内对辣椒疫霉(Phytophthora capsici)具有较强拮抗作用的内生细菌防治辣椒果疫病测定发现,其中有9个菌株6 d后的防病效果大于在70%,4个菌株12 d后的防效仍在55%以上,以来自红海榄(Rhizophora stylosa)叶片内的RS261菌株的防病效果最好。因此,本文对该菌株的分类鉴定、在植物体内的定殖、对辣椒疫病的生防效果及机理进行了研究。
经形态观测、生理生化特征及分子生物学等分析,RS261菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。用抗利福平和拮抗辣椒疫霉双抗标记法,测定RS261菌株的内生定殖寄主范围及其在辣椒体内的定殖动态表明:浸种、灌根和涂抹叶片方法处理后,RS261菌株可以进入辣椒、茄子、白菜、水稻等多种植物体内。RS261菌株通过灌根和涂抹叶片方法处理后,均可主动进入辣椒体内,并迅速向未处理的组织器官转移传导,且可在辣椒体内长期定殖。
RS261菌株对辣椒苗和果疫病防治试验结果表明:菌液浸种12和24 h育出的辣椒苗接种病菌9 d后对辣椒疫病的防病效果分别为72.30%和82.77%;辣椒苗用菌液灌根后间隔0、24、48 h再接种病菌,其9 d后的防效分别为78.43%、84.93%和88.72%;离体辣椒果喷雾菌液后间隔0、24和48 h接种病菌,9 d后对果疫病的防效分别为46.99%、69.83%和62.28%。
RS261菌株培养滤液对辣椒疫霉孢子囊形成和游动孢子释放及辣椒果疫病防治作用测定结果表明:菌株培养滤液喷雾辣椒果24 h后接种病菌,9 d后对辣椒果疫病的防治效果为74.94%,平板培养发现菌株培养滤液对孢子囊形成及游动孢子释放均有明显的抑制作用,其中抑制孢子囊形成效果最好,稀释20倍后抑制率仍有44.4%。
RS261菌株防治辣椒疫病生理生化机制测定结果表明:菌液和清水处理后的辣椒苗体内的可溶性蛋白含量、MDA含量及SOD、CAT、POD、PAL活性变化均较为平稳,说明RS261菌株对辣椒苗可溶性蛋白含量和防御性酶活性无不良影响。但疫霉和菌液+疫霉两处理的辣椒苗MDA含量及SOD、CAT和POD活性处理后呈不断上升趋势,只是菌液+疫霉处理的上升量比疫霉处理的低,而可溶性蛋白含量和PAL活性变化呈现不同趋势,菌液+疫霉处理的辣椒苗内可溶性蛋白含量和PAL活性随时间推移不断上升,而仅接病菌处理却不断下降。由此可见,RS261菌株可以在一定程度上消除病原菌对辣椒体内活性氧清除相关酶(SOD、CAT和POD)的酶活性,共同接种后可诱导寄主体内PAL活性的变化,从而提高寄主的抗性。