桑叶主要次生代谢产物提取工艺优化和含量分析

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桑是药食兼用植物,具有特定的营养价值和药用价值。其含有的生物碱、黄酮、多糖等化学成分,是其抗肿瘤、抑制酶活、抗病毒等生物活性的物质基础,这些成分大多为植物次生代谢的产物。本文对桑叶总黄酮、总多糖、总生物碱等主要次生代谢产物的提取工艺进行了优化,并对119份桑叶样品主要次生代谢产物含量进行了分析。在对超声波辅助提取桑叶总黄酮工艺中的主要条件进行单因素试验的基础上,采用响应面二阶设计方法,以桑叶总黄酮提取率为响应值,选择提取时间、乙醇体积分数、料液比进行三因素三水平优化试验设计,并对结果进行多元回归分析后建立各因子对桑叶总黄酮提取率影响的二次多项回归模型,得到超声波提取桑叶总黄酮的最佳工艺:提取温度50℃,乙醇体积分数80%、料液比1:40(g/mL)、提取时间40min。在此条件下桑叶总黄酮提取率的预测值为1.60%,验证值为、1.59%,表明建立的优化模型能较好地预测超声波辅助提取桑叶总黄酮的提取率。在对超声波辅助提取桑叶总多糖工艺中的主要条件进行单因素试验的基础上,采用响应面二阶设计方法,以桑叶总多糖提取率为响应值,选择提取时间、提取温度、料液比进行三因素三水平优化试验设计,并对结果进行多元回归分析后建立各因子对桑叶总多糖提取率影响的二次多项回归模型,得到超声波提取桑叶总多糖的最佳工艺:提取温度为70℃、料液比为1:30(g/mL)、提取时间为20min。在此条件下桑叶总多糖提取率的预测值为3.6%,验证值为3.56%,表明建立的优化模型能较好地预测超声波辅助提取桑叶总多糖的提取率。在对超声波辅助提取桑叶总生物碱工艺中的主要条件进行单因素试验的基础上,采用四因素三水平的正交试验,通过直观分析法发现影响桑叶总生物碱提取的因素中,主次顺序为乙醇体积分数>提取温度>料液比>提取时间。超声波提取桑总生物碱的最佳工艺条件为:乙醇体积分数95%、提取温度50℃、料液比1:30(g/mL),提取时间30分钟。在此工艺条件下做验证试验,桑叶总生物碱的提取率为2.16%。根据得到的优化工艺条件,对不同来源的白桑及广东桑共计119份种质的桑叶总黄酮、总多糖、总生物碱进行了提取和含量分析,通过Matlab软件建立数据库,并用Matlab软件进行了主要活性成分含量分布差异性分析、种属差异性分析、来源地差异分析、MANOVA聚类分析,选出了活性成分含量高的优异桑种质。发现桑叶总黄酮、总多糖、总生物碱的含量样本间各变量差异比较大。广东桑桑叶总黄酮、总多糖、总生物碱总体含量较高,显著性高于白桑。不同来源地桑品种活性物含量差异明显。通过统计学方法进行科学合理的比较分析达到满意的结果,从而为药用桑树的质量标准制订和桑树资源的多功能开发提供试验分析方法和理论参考。
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