研究背景子宫内膜组织(腺体和间质)出现在子宫腔及肌层以外的部位时,称为子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs),简称内异症。内异症是一种临床常见的良性妇科疾病,但其在生物学上却表现出类似肿瘤的恶性行为。近年来针对其发生发展,国内外学者提出了包括经血逆流、淋巴及静脉播散、医源性种植、体腔上皮化生、在为内膜决定论等在内的多种学说,但其具体的发病机制还尚不清楚,亟需进一步的研究。胶原三螺旋重复蛋白-1(Collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1),是一个28k D的分泌型糖蛋白,最初在大鼠球囊动脉损伤处进行差异表达基因筛选时发现。其主要分布于细胞间隙、血管、胃肠道和子宫平滑肌,可以通过抑制胶原合成并诱导细胞迁移从而促进损伤组织的修复。近年来的许多研究已经表明CTHRC1在多种肿瘤细胞中呈高表达,包括乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌、胰腺癌和黑色素瘤等。其异常高表达通过诱导肿瘤细胞迁移、侵袭,促进血管生成和肿瘤转移等途径促进肿瘤的发生发展。虽然已有研究阐明CTHRC1在许多肿瘤发病机制中起到重要作用,但CTHRC1是否与具有和肿瘤相似的恶性生物学行为的内异症的发生发展有关还不清楚。本研究的目的是检测分析CTHRC1在内异症患者及非内异症患者体内的表达情况,研究CTHRC1对异位子宫内膜间质细胞的迁移、侵袭和增殖能力的影响,进一步探索CTHRC1影响内异症发生发展的内在分子机制,为临床治疗提供新的潜在分子靶点。研究目的研究CTHRC1在子宫内膜异位症发病中的作用。明确CTHRC1对子宫内膜间质细胞迁移、侵袭、增殖能力的影响,并探索其内在的分子机制。材料与方法收集非内异症患者的子宫内膜标本、内异症患者的子宫内膜标本和卵巢异位囊肿标本各12例,用RT-q PCR和Western Blot检测三组样本中CTHRC1在m RNA水平和蛋白水平的表达情况;收集非内异症和内异症患者术前血清各12例,通过ELISA法检测两组血清样本中分泌型CTHRC1蛋白的浓度;收集内异症患者的卵巢异位囊肿标本4例并培养原代细胞,分离出异位子宫内膜间质细胞(EESCs),用免疫荧光法检测细胞纯度;用小干扰RNA(si RNA-CTHRC1)瞬时转染EESCs来抑制CTHRC1的表达,用Western Blot和RT-q PCR检测转染效率;小干扰处理组与阴性对照组分别用划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力变化,CCK8法检测细胞增殖能力变化,流式细胞周期实验检测细胞周期变化,Western Blot检测下游Wnt/β-catenin通路的活性变化。结果1.CTHRC1在内异症患者卵巢异位囊肿组织中的表达水平显著高于内异症患者及非内异症患者的子宫内膜组织;在内异症患者血清中的表达水平显著高于内异症组。2.成功分离培养异位子宫内膜间质细胞,镜下呈长梭形,状态稳定,可传代。3.抑制CTHRC1的表达后,EESCs的迁移、侵袭、增殖能力均显著下降,细胞G1期比例显著升高,S期比例显著降低。4.EESCs在抑制CTHRC1的表达后,Wnt/β-catenin信号通路的活性显著下降。结论1.CTHRC1表达异常可能与子宫内膜异位症的发病有一定相关性。2.CTHRC1可能通过Wnt/β-catenin信号通路影响EESCs的迁移、侵袭、增殖能力。