嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1耐热机制初步研究

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嗜热菌是地球上生活在高温环境中的一类微生物,在基因工程、酶工程、采矿工程和废弃物处理方面有巨大的应用价值。嗜热菌对高温的适应性更是许多科研工作者努力寻求解释的问题。论文以本实验室筛选的嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1为出发菌株,研究了该菌的嗜热程度,发现液体发酵条件下CHB1最低生长温度高于48℃,最高生长温度达74℃.,最适温度为55-65℃,是一株非常耐热的细菌。为了探索CHB1热适应机制,应用蛋白质组学方法比较了对数生长期CHB1在50℃和70℃高温热激条件下蛋白表达的变化,发现了8个差异表达的蛋白,成功鉴定了其中4个蛋白和两个预测蛋白。这4个差异蛋白分别是ClpP蛋白酶、HtrA蛋白酶、乙醇脱氢酶、组氨酸氨基转移酶,两个预测蛋白是甲基转移酶和百草枯诱导的ProteinB。其中ClpP蛋白酶和HtrA蛋白酶均为热休克蛋白,与CHB1耐热机制关系密切。乙醇脱氢酶和组氨酸转移酶为代谢酶类。通过对比60℃培养和低温50℃、高温70℃处理情况CHB1细胞膜脂肪酸的PLFA图谱,发现CHB1细胞膜脂肪酸几乎全为饱和脂肪酸,三个温度条件下几乎不发生不饱和脂肪酸比例的变化,这与CHB1有天然的耐热性相适应。但是,随着温度的升高长链饱和脂肪酸比例明显升高,短链饱和脂肪酸比例有下降趋势,说明CHB1主要依靠增加碳链的长度来适应更高温度的胁迫。
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