【摘 要】
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该研究从一株产甘油氧化酶的日本曲霉(Aspergillus japonicus Saito)出发,首先对其发酵条件进行了一系列的研究,然后通过亚硝基胍诱变,获得一株相对稳定高产的诱变菌株,最后
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该研究从一株产甘油氧化酶的日本曲霉(Aspergillus japonicus Saito)出发,首先对其发酵条件进行了一系列的研究,然后通过亚硝基胍诱变,获得一株相对稳定高产的诱变菌株,最后设计单因子实验和正交实验对原始培养基进行了优化,使酶产量有了显著的提高,从约为1.8U/ml提高到2.4U/ml.通过硫酸铵分级沉淀,凝胶层析,离子交换层析对甘油氧化酶蛋白进行了分离纯化,并通过聚丙烯酰胺电泳对纯化产品进行了鉴定.同时对提纯后的蛋白进行了氨基酸分析,结果与文献报道基本相符.研究了纯化后的甘油氧化酶的理化性质,确定了酶的最佳保存方法为溶于硼酸溶液冷冻保存,反应的最佳条件为30℃,缓冲液最佳pH值为7.0,同时发现金属离子对酶的活力有增强作用.
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