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子宫内膜异位症(Endometriosis, EMT)简称内异症,是指具有生长能力的子宫内膜腺体及间质生长于子宫腔被覆粘膜以外部位的妇科疾病。它是一种始于细胞水平,止于盆腔疼痛和不孕为特征的持续性病变。以盆腔疼痛、不孕、月经不调为主要临床表现。2000年Buyalos等首次提出“Endometriosis- associated infertility",即内异症性不孕症。近年来发病率呈上升趋势,育龄妇女发病率为10%~15%,在患不孕症患者中为32%~48%,严重困扰着广大妇女的身心健康。虽然内膜种植学说已被广泛认可,但经血逆流是育龄妇女经期常见的现象,却只有10%~15%的妇女罹患内异症,说明经血逆流可能仅为诱因。近年来的新观点认为盆腔内环境异常可能是促进异位内膜细胞得以在盆腔种植并生长的重要原因。有学者认为子宫内膜异位症是与腹腔一般炎症反应有关的多基因疾病,现认为内异症的病理生理过程与腹腔的氧化应激有关。考虑盆腔及全身的氧化应激可能是多种内异症致病因子的共同体现形式。8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)是花生四烯酸在自由基的作用下经非酶途径产生的,是脂质过氧化的特异性产物,并且目前的检测方法发现体内有稳定的水平,可作为目前评价氧化应激和脂质过氧化最可行的生物标记。因其不受饮食中脂质的影响,成为评定抗氧化剂使用剂量的敏感指标。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。它的生理功能主要是催化谷胱甘肽(Glutataione, GSH)参与过氧化反应,清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基,从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。是评价机体抗氧化能力的重要指标。对于内异症的诊断和治疗,针对多种病因引起的共同病理生理过程进行探讨,较从单个细胞因子或基因着手,相对更有临床应用价值。对于内异症伴不孕症患者机体的氧化应激状态及其指标的研究,可以指导内异症的诊断和治疗方向。目的本课题探索8-iso-PGF2α和GSH-Px在子宫内膜异位症伴不孕症患者血清及腹腔液中的水平,以及二者在不同病变程度中的差异。进而探讨二者在子宫内膜异位症伴不孕症发生发展中的关系,为临床治疗以及预防子宫内膜异位症伴不孕症的发生发展提供新的思路和理论依据。材料与方法1研究对象选择2009年9月到2010年2月在郑州大学第三附属医院行腹腔镜手术中及术后病理诊断明确为子宫内膜异位症且合并原发或继发不孕的50例患者为研究对象,即内异症伴不孕组,平均年龄(31.701±7.531)岁,按R-AFS分期:Ⅰ期10例,Ⅱ期12例,Ⅲ期13例,Ⅳ1 5例,Ⅰ、Ⅱ期22例组合为A组,Ⅲ、Ⅳ期28例组合为B组。随机选择同期我院行腹腔镜手术的无子宫内膜异位症、盆腔结构正常、月经周期规则、有生育史的女性30例为对照组,平均年龄(29.411±5.367)岁,两组间年龄差异无统计学意义。排除标准:①术前3个月服用过激素类药物;②腹腔镜检查证实有子宫腺肌病和卵巢肿瘤病史;③有严重的其他系统疾病(凝血功能障碍、免疫系统疾病、严重心血管及肝、肾疾病等);④处在急性炎症反应阶段或有严重过敏史及过敏体质。所有研究对象均签署了知情同意书。2实验方法2.1标本采集血液标本:两组患者均在术前清晨空腹抽取静脉血约3ml置于无菌试管中。常温下静置1h促进凝血后,离心机离心2500 r/min,离心10min,放于-80℃冰箱保存。腹腔液标本:两组患者均在腹腔镜下处理病变部位前,直视下抽取子宫直肠陷凹腹腔液5-10ml置于无菌试管后,立即离心,2500 r/min,离心10min,放于-80℃冰箱保存。收取标本均在患者知情同意下进行,并记录个人信息及病史资料,分组编号,待所有样本采集完毕后同批测定。2.2实验方法采用酶联免疫放射吸附法(ELISA法)测定血清及腹腔液标本中的8-iso-PGF2α。8-iso-PGF2αELISA试剂盒来自RD公司。操作按说明书进行;采用化学比色法测定血清及腹腔液标本中GSH-Px, GSH-Px试剂盒购于南京建成生物工程研究所。操作按说明书进行。3统计学处理实验数据分析采用统计分析软件SPSS16.0进行分析。计量资料以平均数±标准差(x±s)表示,样本均服从正态分布,方差齐性检验提示样本方差齐,故两组间差异性比较采用独立样本t检验,检验水准均为α=0.05。显著性差异为P<0.05,非常显著性差异为P<0.01。结果1子宫内膜异位症并不孕组与对照组一般资料的比较50例子宫内膜异位症并不孕症妇女和30例对照妇女的年龄差异无统计学意义(P>0.05)。2 8-iso-PGF2α在血清和腹腔液中的表达情况8-iso-PGF2α在内异症不孕组和对照组的血清以及腹腔液中均有表达。内异症不孕组血清和腹腔液中8-iso-PGF2α的表达量均较对照组显著升高(P<0.01)。内异症不孕B组(Ⅲ、Ⅳ期)血清和腹腔液中8-iso-PGF2α的表达量较A组(Ⅰ、Ⅱ期)显著升高(P<0.01)。3 GSH-Px在血清和腹腔液中的表达情况GSH-Px在内异症不孕组和对照组的血清以及腹腔液中均有表达。内异症不孕组血清和腹腔液中GSH-Px的表达量均较对照组显著降低(P<0.01)。内异症不孕B组(Ⅲ、Ⅳ期)血清和腹腔液中GSH-Px的表达量均较A组(Ⅰ、Ⅱ期)显著降低(P<0.01)。结论1子宫内膜异位症并不孕症患者体内存在氧化应激。2氧化应激与子宫内膜异位症的严重程度密切相关。3 8-iso-PGF2α可作为检测子宫内膜异位症并不孕症患者体内氧化应激水平及预后评估的指标。