血压是波动的。血压在一段时间内波动的程度和性质称为血压波动性（BPV）。大鼠去窦弓神经（SAD）可引起BPV明显增高，但24小时平均血压 并不增加。作者以往的研究表明：SAD大鼠的心血管发生重构。细胞凋亡在高 血压病的心肌重构中起重要作用。但在SAD大鼠模型中，由于单纯BPV增高引 起的心肌重构中是否伴有心肌细胞凋亡？与细胞凋亡相关蛋白的基因表达是否 发生改变？目前尚不清楚。 高血压病是多基因遗传病，呈遗传易感性与环境因素相结合的发病模式，随 着分子生物学技术的发展，人们对原发性高血压病的遗传学病因进行了研究，并 获得了一些与原发性高血压相关的候选基因，但在SAD大鼠这些与高血压相关 的侯选基因是否发生改变未见报告。 鉴于上述原因，本实验应用SAD大鼠作为实验动物，进行以下研究： （1）SAD大鼠的心肌细胞凋亡。 （2）SAD大鼠的心肌细胞凋亡相关基因表达。 （3）AngⅡ、ACE、NO和TNF-α在SAD大鼠心肌重构中的意义。 （4）ACEI卡托普利对SAD大鼠心肌细胞凋亡的影响。 （5）SAD大鼠及SHR的基因组多态性。 方 法 10周龄SD大鼠行SAD或Sham，术后动物随机分为4、8、16和32周组， 另设卡托普利治疗组（SAD＋Cap；口服100mg·kg·d），直至术后16周。应用 放免、紫外分光光度法、硝酸还原酶法和双抗体夹心酶联免疫法分别测定血浆和 心肌Ang Ⅱ、ACE、NO和TNF-α含量；应用光镜和电镜观察组织病理学和超 微结构的改变；应用TUNEL法检测心肌细胞原位凋亡；通过免疫组化染色和 RT-PCR检测bcl-2、bax、fas和fas-L蛋白及mRNA表达，并对结果进行计算机 图像定量分析；应用PCR-SSLP和RAPD-PCR对SAD大鼠及SHR的基因组多 态性进行研究。 一Ill 一 博士学位论文 去实弓神经大鼠心肌细胞凋亡和基因组多态性的研究 陶 霞 结 果 一、SAD大鼠心脏的基本形态定量特征 与Shaxn组相比，SAD大鼠的体重减轻，心脏重量、左心室壁厚、左心室胶 原容积分数呈进行性加重，左心室内径呈进行性减小。 H、S皿大鼠血桨和心肌峋 11、ACE、NO和 hF川含量（ 与 Sham组相比，SAD大鼠血浆中 Aug 11无明显变化，ACE活性和 NO水 平明显降低，TNF－u水平增高；心肌中 Aug 11含量升高，ACE活性和 TNF a水 平增高，NO水平降低。 三、SAD大鼠心肌的组织病理学改变 组织病理学检查发现，Sham 4周大鼠心肌组织及各级冠状小动脉均无明显 病理学改变。Sham 8、16和 32周大鼠心肌组织可见轻度局灶性肿胀和肥大，心 肌束间及血管周胶原纤维增加不明显。SAD 4周大鼠，部分心肌细胞肿胀、肥大、 坏死和心肌纤维断裂，可见少量淋巴细胞、巨噬细胞和成纤维细胞等浸润，心肌 内可见灶性出血，血菩周胶原纤维增多（反应性纤维化）。SAD 8、16和 32周， 心肌细胞肿胀、肥大加重，心肌纤维断裂，可见较多淋巴细胞、成纤维细胞浸润， 心肌束间胶原纤维显著增多，心内膜处更明显，心肌内冠状小动脉进行性管壁增 厚，血管周胶原纤维显著增加。在16和32周，断裂和坏死的肌纤维由增生的纤 维组织替代（修复性纤维化）。 四、SAD大鼠心肌的超微结构改变 Sham 4周大鼠心肌组织无明显病理学改变，心室肌细胞排列规则，心肌细 胞和血管内皮的核无明显改变，Sham 8、16周大鼠心肌细胞呈轻度线粒体肿胀， 小灶性肌丝溶解，Z带未见明显移位，心肌细胞核和血管内皮细胞核也未见明显 异常。SAD 4周大鼠心肌细胞线粒体肿胀，部分呈髓鞘样结构形成，可见灶性肌 丝溶解，肌浆网空泡化明显，部分心肌细胞和毛细血管内皮细胞核染色质浓缩， 边集于核膜下，间质成纤维细胞增生，胶原纤维增多。SAD 8、16和 32周大鼠 心肌细胞线粒体数目增多，增生的线粒体内峭排列紊乱，部分线粒体肿胀，可见 典型的髓鞘样结构，心肌纤维内可见较多的片状肌丝溶解，肌浆网空泡化明显， 可见较多心肌细胞和血管内皮细胞核染色质浓缩，边集于核膜下，部分心肌细胞