人类肠易激综合征粪便钙卫蛋白与双歧杆菌关联性的研究

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目的:钙卫蛋白(Calprotectin)最早是由Fagerhol等在1980年从中性粒细胞中分离出来,命名为L1蛋白。同时因具有保护性、多功能、结构与钙结合的特性,又被称为钙卫蛋白。钙卫蛋白是一种主要来源于中性粒细胞和巨噬细胞的杂合性的钙结合蛋白,广泛分布于人体组织、体液和细胞中。钙卫蛋白在钙离子存在的情况下具有抗蛋白酶活性,在肠腔和外界环境中可以长期保持稳定而不被各种酶和细菌破坏,具有抗微生物、调节免疫、抗增殖、传递信号等多种生物学功能。在许多炎症情况下其含量增加,具有组织或细胞特异性,因此通常被作为急性炎性细胞活化的标志物,成为临床上区分功能性和器质性肠道疾病可靠又简便的方法之一。双歧杆菌(Bifidobacterium)是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌,末端常常分叉,故名双歧杆菌。双歧杆菌作为肠道菌群中最重要的的优势菌,现已证明在维护肠道正常细菌菌群平衡,抑制病原菌的生长,防止便秘,下痢和胃肠障碍、抗肿瘤、在肠道内合成维生素、氨基酸和提高机体对钙离子的吸收、降低血液中胆固醇水平、防治高血压、增强人体免疫机能,预防抗生素的副作用、抗衰老等方面具有重要意义。肠道环境中双歧杆菌的含量对于判断肠道微生态系统的状态,预防和治疗因菌群失调引起的肠道系统疾病具有重要的临床意义。本研究旨在通过实验探讨人类肠易激综合征患者粪便中钙卫蛋白与双歧杆菌数量间的关系,了解人类肠易激综合征粪便钙卫蛋白与双歧杆菌数量间关联性以其深讨肠道优势菌群抗感染的机制,为研究利用双歧杆菌防治肠易激综合征提供基础。方法:1.病例选择:健康成人组:平均年龄40岁,于2008年3月—10月期间来大连市第二人民医院体检人员30例。肠易激综合征患者组:平均年龄42岁,于2008年1月—12月期间来大连市第二人民医院就诊并确诊为肠易激综合征患者30例,其中男18例,女12例。2.标本采集:采集两组新鲜粪便,从中间部采集标本。将0.5克粪便标本立即加入4.5ml无菌稀释液作连续10倍梯度稀释,取各稀释梯度被检液涂在双歧杆菌选择性培养基(BL)中,于37℃,厌氧条件培养,培养72小时,计数。3.酶联免疫吸附试验定量检测两组粪便标本中的钙卫蛋白。结果:1.传统的菌群分析法定量检测健康组与肠易激综合征组双歧杆菌菌数差异有显著性(P<0.001)。2.酶联免疫吸附试验定量检测健康组与肠易激综合征组钙卫蛋白含量差异有显著性(P<0.001)。3.Pearson相关分析表明:健康组与肠易激综合征组两组钙卫蛋白含量与双歧杆菌数量间有相关性(r=0.885, P<0.001)。结论:人类肠易激综合征粪便钙卫蛋白水平降低,双歧杆菌呈降低趋势;双歧杆菌可能是维持体内钙卫蛋白稳定的影响因素之一。
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