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鲤春病毒血症(Spring viraemia of carp，SVC)是由鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus，SVCV)引起的鲤科鱼类(主要为鲤鱼)一种重要疾病。SVC被国际兽疫局指定为一种必须紧急报告的疾病，这种疾病在欧洲鲤鱼养殖中普遍发生，导致严重的发病率和死亡率。鲤鱼是我国重要的养殖鱼类，易于养殖并适应环境的变化。一旦鲤鱼感染了SVCV，严重威胁着鲤鱼的生存和经济价值。先天免疫系统是抵御微生物入侵的有效防御系统。TLR通路通过识别病原体相关分子模式，感知病原微生物的存在，并引发免疫反应。在TLR信号通路传递上游信息和疾病发生发展中都有MyD88参与。表明MyD88在宿主感染病毒引发的信号通路中起重要作用。因此，本研究通过RT-PCR探讨了TLR信号通路与SVCV之间的相互作用关系，同时分别以EPC细胞和鲤鱼为实验对象，感染SVCV，并使用ST2825抑制MyD88蛋白的表达，通过WesternBlot，RT-PCR和流式细胞技术检测当SVCV感染时，TLR信号通路及下游免疫相关基因的变化和对细胞凋亡的影响。其结果有助于深入了解SVCV的致病机理，为鲤春病毒血症病毒的发病的防御提供理论基础。
结果表明，当SVCV感染鲤鱼上皮细胞后，通过RT-PCR检测TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9在不同时间(0h、6h、12h、24h和48h)的mRNA的表达。与对照组相比，TLR7和TLR8在6h表达水平最高(P＜0.05)，其TLR3和TLR4在12h表达水平最高(P＜0.05)，TLR2和TLR9在48h表达水平最高(P＜0.05)。通过WesternBlot证明，ST2825能够抑制EPC细胞中MyD88蛋白的表达。当抑制MyD88的表达时，SVCV-G的mRNA表达也降低，并且TLR信号通路下游的IRAK1和IRF7的mRNA转录水平下调(P＜0.05)。TRAF6和IRF3的转录水平无显著影响(P＞0.05)。通过流式细胞技术检测发现与SVCV组相比，ST2825处理组可以降低细胞凋亡率。在肾组织中，与对照组相比，ST2825组和SVCV组TRAF6、IRAK1、IRF3和IRF7的mRNA的表达显著升高(P＜0.05)。与SVCV组相比，ST2825处理组中IRF3和TRAF6的mRNA转录水平无影响(P＞0.05)，IRF7和IRAK1的mRNA转录水平下调且差异显著(P＜0.05)。
结果表明，当SVCV感染鲤鱼上皮细胞后，通过RT-PCR检测TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9在不同时间(0h、6h、12h、24h和48h)的mRNA的表达。与对照组相比，TLR7和TLR8在6h表达水平最高(P＜0.05)，其TLR3和TLR4在12h表达水平最高(P＜0.05)，TLR2和TLR9在48h表达水平最高(P＜0.05)。通过WesternBlot证明，ST2825能够抑制EPC细胞中MyD88蛋白的表达。当抑制MyD88的表达时，SVCV-G的mRNA表达也降低，并且TLR信号通路下游的IRAK1和IRF7的mRNA转录水平下调(P＜0.05)。TRAF6和IRF3的转录水平无显著影响(P＞0.05)。通过流式细胞技术检测发现与SVCV组相比，ST2825处理组可以降低细胞凋亡率。在肾组织中，与对照组相比，ST2825组和SVCV组TRAF6、IRAK1、IRF3和IRF7的mRNA的表达显著升高(P＜0.05)。与SVCV组相比，ST2825处理组中IRF3和TRAF6的mRNA转录水平无影响(P＞0.05)，IRF7和IRAK1的mRNA转录水平下调且差异显著(P＜0.05)。