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肺癌位居我国恶性肿瘤发病和死亡的首位,且其发病率近年来仍呈现着不断上升的态势;乳腺癌在我国许多大城市其发病率和死亡率均居高不下,成为女性健康最大的威胁。传统的化疗方法一直作为治疗肿瘤的有效措施,但其有效率低,毒副作用大,现阶段已经达到平台期。分子靶向治疗是一种较新型的癌症治疗手段,它的出现意味着在肿瘤生物治疗方面将会有一个全新的时代。寻找有价值的分子标志物对于分子靶向治疗至关重要。在本研究中拟通过肺癌及乳腺癌组织切片对影响其发展进程的相关蛋白进行研究,并进一步在细胞水平上对影响细胞周期进程的相关蛋白进行研究。第一部分为免疫组织化学实验。目的:探讨在Epacl和PKC蛋白在肺癌组织以及癌旁组织中的表达水平,并进一步在肺癌组织中对这两种蛋白表达水平进行关联性分析及其与AKAP95和Cx43蛋白表达的关联性分析;Epacl、PDE4和PKC蛋白在乳腺癌及其癌旁组织的表达水平;Epacl、PDE4和PKC蛋白之间表达的关联性分析,及其与AKAP95、Cx43蛋白之间表达的关联性分析。方法:采用PV-9000两步法免疫组化方法检测蛋白的表达。结论:1.Epacl蛋白在肺癌组织中可能参与抑制癌症的发生、发展和迁移。但在乳腺癌组织中Epacl蛋白可能促进癌症的发生发展进程,提示该蛋白对癌症进程的调控可能存在组织特异性;2.PDE4蛋白参与促进乳腺癌的发生和恶化;3.在肺癌组织中,Epacl和PKC蛋白、Epacl和Cx43蛋白,以及PKC和AKAP95蛋白在肺癌组织中的表达呈现关联性表达,推测Epacl可能通过调节PKC和Cx43蛋白参与调控肺癌细胞周期进程;但在乳腺癌组织中Epacl和Cx43、PKC蛋白均未发现关联性表达,进一步验证了 Epacl调控癌症进程的机制可能存在着组织特异性。第二部分细胞生物学实验,目的:探索AKAP95和Cx43蛋白、AKAP95和CyclinE2蛋白的结合对细胞周期进程的作用。方法:选取BEAS-2B细胞作为研究对象,在血小板源性生长因子PDGF-BB的作用下,CCK-8检测2B细胞的增殖情况,Western Blot和IP检测AKAP95、Cx43和CyclinE2蛋白表达量以及AKAP95和Cx43蛋白、AKAP95和CyclinE2蛋白的结合量的变化,并对影响结合的蛋白激酶进行进一步研究。结论:1.2B细胞中,PDGF-BB可以促进细胞增殖;AKAP95、Cx43和CyclinE2蛋白的表达量上升。2.AKAP95和Cx43蛋白的结合会抑制人正常肺上皮细胞增殖,AKAP95和CyclinE2蛋白的结合可以促进人正常肺上皮细胞增殖,提示Cx43和Cyclin E2蛋白在细胞周期进程中可能竞争性地与AKAP95蛋白结合,且该过程可能是通过蛋白激酶Erk1/2介导的。