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研究背景:椎间盘退变时慢性腰痛的一个重要病因,对此,目前尚缺乏有效的治疗手段。近来用椎间盘移植或椎间盘细胞移植来修复退变椎间盘的研究已取得较大的进步。实验证实椎间盘细胞移植可以起到抑制椎间盘退变的作用。但是由于椎间盘细胞在体外培养时增殖能力较弱,如何提供高质量和数量的椎间盘细胞仍是现阶段的研究重点。目的:通过不同的方法培养兔髓核细胞,对比在两种培养体系里生长的髓核细胞形态以及合成代谢能力的异同,探讨合适的髓核细胞培养方法。并通过经皮髓核细胞移植来观察移植的兔髓核细胞是否可以抑制髓核抽吸术后椎间盘的退变,探讨采用髓核细胞修复椎间盘的可行性。方法:采用胰酶+胶原酶联合消化法分离兔髓核细胞,分离所获细胞一部分用DMEM/F12混合培养基进行单层培养,其余的采用低速离心使其形成小球形聚集体,并在聚丙烯离心管中进行培养。在培养相同时间后,分别检测能够反映髓核细胞合成硫酸化蛋白聚糖能力的35S摄取率来比较两种培养体系里髓核细胞的合成代谢能力。并采用组织学技术比较两种培养方法所培养的髓核细胞在形态上的异同。为了评估髓核细胞在治疗椎间盘退变中潜能,我们选择PG合成能力较强的三位小球法培养的髓核细胞,将其移植到经皮穿刺髓核抽吸术后的兔L2/L3、L3/L4和L4/L5椎间盘内,用培养液椎间盘内注射作为对照。并在手术14天后分别采用MRI和病理学检查,观察兔椎间盘的变化。结果:两种培养体系里的兔髓核细胞形态较为稳定。两种培养体系里的髓核细胞35S摄取率均随时间增加,但三维小球法培养的髓核细胞35S摄取率高于单层培养的髓核细胞。MRI检查显示髓核抽吸组椎间盘发生T2信号降低的椎间盘多于单纯穿刺组,病理分级显示,髓核抽吸组椎间盘退变程度重于单纯髓核穿刺组,可以导致更多和程度更重兔椎间盘退变。MRI检查显示移植组发生T2信号降低椎间盘数少于对照组,病理分级结果移植组椎间盘退变程度轻于对照组组。结论:(1)三维培养的髓核细胞蛋白聚糖的合成能力高于单层培养的髓核细胞。(2)经皮穿刺髓核抽吸术可诱发兔椎间盘退变。(3)移植髓核细胞可抑制髓核抽吸术后兔椎间盘的退变。