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第一部分 APP/PS1转基因AD模型小鼠早期行为学的改变目的 研究APP/PS1转基因AD模型小鼠早期行为学及其特征性病理的改变情况,为进一步研究AD发生发展中形态结构的改变提供理论基础。方法 10月龄雌性APP/PS1双转基因AD小鼠(APP/PS1组)及同月龄同窝生野生型雌性小鼠(Wild-type组)各12只,运用Morris水迷宫检测小鼠的空间学习和记忆能力,前六天为定位航行实验,记录每只小鼠60 s内寻找平台的时间(即逃避潜伏期),第七天为空间探索实验,记录测试小鼠在目标象限游泳时间以及穿越平台位置的次数。Morris水迷宫测试后,选取APP/PS1组及Wild-type组小鼠各7只,麻醉灌注后取出大脑,沿纵轴将大脑分成左右半球,抽取一侧大脑半球依次进入梯度蔗糖水中脱水后于低温冷冻切片机中作50μm连续大脑组织切片,按照体视学的方法对含有海马的等距离切片进行5次连续等距离抽样。从5组等距离海马组织切片中随机选择一组进行老年斑染色,观察海马组织内老年斑沉积的情况。结果 定位航行实验结果显示:与野生型小鼠(Wild-type组)相比,10月龄雌性APP/PS1双转基因AD小鼠(APP/PS1组)的逃避潜伏期显著延长(P<0.01),且在第2天(P=0.045)、第4天(P=0.038)、第5天(P=0.044)、第6天(P=0.042)两组的逃避潜伏期均具有显著性差异。空间探索实验结果显示,10月龄雌性APP/PS1双转基因AD小鼠(APP/PS1组)穿越平台的次数与平台所在象限时间百分比均较野生型小鼠(Wild-type组)显著减少(P=0.007,P=0.041)。免疫组化结果显示:Wild-type组海马各亚区内均无Aβ阳性斑块的沉积,APP/PS1组海马各亚区内Aβ阳性斑块明显沉积。结论 10月龄APP/PS1转基因AD雌性小鼠空间学习记忆能力已出现障碍,且已伴有明显的Aβ沉积的特征性病理改变。第二部分 AD早期海马及海马内胆碱能神经元的改变目的 应用体视学三维定量方法研究APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马及海马内胆碱能神经元的早期改变情况。方法 Morris水迷宫测试后,选取APP/PS1组及Wild-type组小鼠各7只,麻醉灌注后取出大脑,沿纵轴将大脑分成左右半球,抽取一侧大脑半球依次进入梯度蔗糖水中脱水后于低温冷冻切片机中做50μm连续组织切片,按照体视学方法对含有海马组织的等距离切片进行5次连续等距离抽样。从获取的5组等距离海马组织切片中随机选择一组进行胆碱能免疫组织化学染色,运用体视学测试系统计算海马各亚区的体积,并计数海马各亚区内胆碱能神经元的数量。结果 与Wild-type组相比,APP/PS1组海马DG的体积显著减小24%(P<0.01);APP/PS1组海马CA1区、CA2/3区的体积与Wild-type组相比差异无统计学意义(P=0.089,P=0.059);APP/PS1组海马CA1、CA2/3区内胆碱能神经元的总数与Wild-type组相比均差异无统计学意义(P=0.076,P=0.074);APP/PS1组海马DG内胆碱能神经元的数量较Wild-type组显著减少34%(P=0.017)。结论 10月龄雌性APP/PS1双转基因AD小鼠海马DG的体积及DG内胆碱能神经元的数量存在丢失,这可能是AD早期行为学改变的结构基础之一,通过早期保护海马DG内胆碱能神经元,或许可以延缓AD的发展进程。