蚜虫是全球范围内广泛分布的一类半翅目昆虫,其中的很多种类能够严重危害多种粮食作物、蔬菜、水果及牧草等。同时,蚜虫还会传播植物病毒,是农林生产中最常见的病媒害虫之一。目前主要依赖化学杀虫剂进行防治,但由于化学农药的长期大量使用使蚜虫的抗药性水平不断上升,亟待探索新的蚜虫防治方法。近年来,RNAi技术的发展在害虫防治之中展示出巨大潜力,且基于RNAi的作物保护技术在蚜虫种群控制方面也表现出了潜在优势。合适的靶标基因是开展RNAi抗蚜技术的首要条件,筛选具有潜力的致死基因对RNAi防蚜技术的发展具有非常重要的意义。此外,现有研究表明仅靠单独应用RNAi可能很难在田间有效控制害虫,探索RNAi与蚜虫化学防治联合应用将有助于解决这一问题。为了解答这些问题,本研究以豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)为试验对象,采用饲喂法RNAi筛选致死基因,并将相关基因ds RNA与化学杀虫剂吡虫啉(imidacloprid)进行了联合应用实验,取得了以下主要结果:(1)在绿色型豌豆蚜中筛选到3个对其具有高效致死效果的基因,分别为:蚜虫免疫相关基因(Ap Cactus)、蛋白转运相关基因(Ap Coa)和snf7同源基因(Ap Cmb4b),当ds RNA饲喂终浓度为1000ng/μL时,7d内可致豌豆蚜死亡率达到100%。同时,ds RNA浓度梯度实验表明:蚜虫RNAi效率与ds RNA浓度存在正相关关系,且致死基因ds RNA对豌豆蚜的最低效应浓度约为300ng/μL。(2)为进一步验证致死基因是否对蚜虫具有普遍性,我们又在红色型豌豆蚜中进行了ds RNA饲喂试验,发现Ap Cactus、Ap Coa和Ap Cmb4b 3个致死基因对红色型豌豆蚜同样具有高效的致死效果,但这3个基因在红色型和绿色型豌豆蚜中的RNAi效率略有不同,在ds RNA饲喂终浓度为800ng/μL及以下时,红色型豌豆蚜的死亡率普要高于绿色型豌豆蚜。(3)在致死基因dsRNA与吡虫啉联合应用试验中,我们发现终浓度为600ng/μL的Ap Cmb4b、Ap Cactus、Ap Coa与0.05mg/L的吡虫啉联合使用后会使豌豆蚜的存活率严重下降,其死亡率分别为93.33%、70.00%和53.23%。本研究结果表明ApCmb4b、ApCactus和Ap Coa基因具有成为RNAi抗蚜技术靶标基因的潜力;ds RNA对不同体色型豌豆蚜的致死效率不同;饲喂ds RNA对蚜虫死亡率的影响呈现显著的剂量效应;ds RNA和低剂量常规化学杀虫剂吡虫啉联合应用可有效控制蚜虫。本研究为利用RNAi技术控制蚜虫提供了新的基因,而且为探索传统农药的减量应用提供了理论基础,对于建立和推动绿色高效的蚜虫防治新技术具有重要意义。