目的:前期实验证实晚期糖基化终产物(AGE)随年龄增加在椎间盘内累积是椎间盘退变的重要危险因素,其可以促进髓核细胞凋亡,加速细胞外基质代谢失衡。但其中确切分子机制尚未完全明确,本实验旨在进一步探究AGEs与内质网应激、凋亡、钙稳态之间的关系。方法:用不同浓度AGEs(PBS,AGEs 100μg/ml,AGEs 200μg/ml)处理人髓核细胞,或使用钙通道拮抗剂U73122,xestospongin C和Ryanodine预处理后。分别于0 h,12h,24 h三个时间点检测。分别用钙离子特异性探针Fluo 4/AM/Mag-Fluo 4/AM检测胞质内钙浓度/内质网内钙浓度,蛋白免疫印迹Western blot和实时定量荧光PCR检测内质网膜钙泵SERCA和钙通道IP3R和RyR的蛋白和转录表达水平,ELISA检测细胞内IP3表达水平,AnnexinV-APC/7-AAD染色流式检测髓核细胞凋亡率。结果:AGEs可以引起浓度依赖性和时间依赖性胞质钙超载和内质网钙耗竭,同时伴有钙泵SERCA蛋白和转录水平减低,钙通道IP3R和RyR蛋白和转录水平增高,细胞内IP3表达水平增高;使用钙通道拮抗剂预处理可以显著抑制细胞内钙稳态失衡,内质网应激及细胞凋亡结论:钙稳态失衡在AGEs介导的内质网途径髓核细胞凋亡中扮演着重要角色,通过抑制内质网钙过度释放可以缓解细胞内钙稳态失衡、内质网应激及细胞凋亡。同时,我们的实验结果也为AGEs在椎间盘退变中作用及机制研究提供了新的理论依据。