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研究背景:脾虚是临床常见的证型,而脾虚证多表现为黏膜的损伤如糜烂、溃疡等。益气健脾中药在治疗此类疾病时常能获得良好效果,能明显改善黏膜功能障碍的主观症状及客观病理表现。黏膜损伤后存在自主修复的过程,在这个过程的第一阶段即快速修复中,多胺能促进细胞迁移,在黏膜损伤修复过程中起着非常重要的作用。多胺的限速酶鸟氨酸脱羧酶,是多胺合成途径上第一个受到严格调控的酶,通过影响多胺的合成发挥其对生物生长和组织损伤后修复的重要作用。目的:本研究以大鼠应激性溃疡为黏膜损伤模型,考察甘草、党参对大鼠应激性溃疡模型的作用,并研究其发挥作用的过程中胃和小肠黏膜中多胺含量的变化,观察胃组织中鸟氨酸脱羧酶的表达,为益气健脾中药对胃肠黏膜损伤修复作用机制的研究提供参考。方法:1、复制水浸-束缚大鼠应激性胃溃疡模型,选择合适的阳性对照药。2、建立胃、肠黏膜组织中多胺的HPLC测定方法,考察多胺测定方法的线性关系。3、以甘草、党参水煎液为受试药,于造模前半小时给药,造模后处死动物,观察大鼠胃溃疡指数;HE染色观察胃窦的病理改变;免疫组化法观察胃窦组织中鸟氨酸脱羧酶的表达情况;ELISA法测定胃黏膜中鸟氨酸脱羧酶的含量变化;高效液相柱前衍生化法测定胃和肠黏膜中多胺的含量变化。4、提取甘草、党参中的皂苷、黄酮和多糖部分,并测定各部分的含量。将各部分作用于IEC-6细胞迁移模型,筛选出有效部分。成果:1、建立了测定胃和小肠黏膜中多胺的含量测定方法,腐胺的回归方程为:y=12.90x-1.058,r2=0.999,线性范围为1.15-28.80(×10-10mol);精脒的回归方程为:y=39.22x-5.661,r2=0.999,线性范围为3.57-89.23(×10-10mol);精胺的回归方程为:y=24.62x-3.933,r2=0.999,线性范围为2.21-55.24(x10-10mol)。在线性范围内,各样品的线性关系良好。2、甘草给药剂量为7.5g/kg和15g/kg时可一直胃溃疡发生;光镜下检查胃黏膜组织的病理学变化显示,甘草有胃黏膜损伤修复作用;免疫组化法检查胃组织中的ODC,正常组表达较少,模型组表达较多,阳性对照组和甘草高剂量组组由于保护胃黏膜作用,抑制了溃疡的发生,ODC表达也较少,甘草低剂量组则介于模型组与高剂量组之间;酶联免疫吸附法结果与免疫组化法结果相符;高剂量组胃粘膜中精脒和精胺含量明显高于模型组;甘草高剂量组小肠黏膜中腐胺含量明显高于模型组,而精脒含量却低于模型组,精胺含量各组之间差异不明显。3、党参给药剂量为5g/kg和15g/kg时可以抑制胃溃疡的发生;光镜下检查胃黏膜组织的病理学改变显示,党参有胃黏膜损伤修复作用;免疫组化法检测胃组织中的鸟氨酸脱羧酶表达,党参给药组ODC表达都很少;酶联免疫吸附法测定ODC含量,各组之间差异不明显。正常组胃黏膜中精胺的含量均低于其他组别,而阳性对照药EGF组和党参给药组精胺的含量高于模型组;小肠黏膜中腐胺的含量测定结果显示阳性对照药EGF组和党参给药组精胺的含量高于模型组和正常组;党参给药组的精脒和精胺含量与模型组之间的差异也有统计学意义。结论:建立的测定胃和小肠黏膜中多胺含量的方法准确、稳定、可靠;甘草、党参有促进黏膜损伤后修复的作用,该作用可能与影响提高多胺含量和影响鸟氨酸脱羧酶表达有关。