芥子气（SM）属于糜烂性化学战剂,目前仍然威胁着公共安全。SM毒理机制尚不确切,但主流认为其毒性主要源于SM对DNA的烷基化损伤。SM-DNA加合物（包括N~7-HETEG、N~3-HETEA、O~6-HETEG及N~7-Bis G）是SM诱导的DNA损伤相关的生物标志物,可以用于溯源SM暴露情况以及确定人体内损伤程度。液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法逐渐成为检测分析DNA加合物的金标准,本论文目的即基于实验室LC-MS系统,建立一种重复性好、特异性强、灵敏度高、快速准确的分析检测SM-DNA加合物的方法。SM-DNA加合物含量低、基质复杂,在基于LC-MS系统分析前应进行适当的前处理,通常为DNA提取、加合物水解与加合物纯化步骤。本论文基于DNA损伤考察结果,对基于盐析法、离心柱法、磁珠法提取DNA进行了方法评价,基于单因素考察与正交试验法对加合物的水解方法进行了确定,重复文献中的纯化方法并指出其局限性与解决方案。系统优化了仪器检测条件,创造性地提出向流动相中添加碳酸氢铵缓冲盐以改善分离等问题。结合药典,对所构建的分析方法进行方法学验证,考察了方法的检测限、线性范围、精密度等参数,进一步,将构建的方法应用于体外染毒血样及细胞样中进行分析研究,考察SM-DNA加合物与SM的量时量效关系等。结果表明,基于磁珠法提取SM染毒后DNA的富集效率较高;基于一步酶解法水解SM-DNA加合物,简便快速稳定;结合在线滤器与预柱,简单的高速离心即可实现纯化,有效缩短了前处理时间,提高了富集效率。水流动相中适量碳酸氢铵缓冲盐的引入,SM-DNA加合物的色谱峰之间实现了完全分离,N~7-Bis G的质谱响应有了较大提升。对于ctDNA样品,N~7-HETEG在SM染毒终浓度为0.5 ng/m L时可检出,线性范围至500 ng/m L,染毒浓度较高时发现了可能的新位点加合物。对于全血样品,在SM染毒终浓度为0.5μg/m L时可检出N~7-HETEG,染毒终浓度为1μg/m L时达到定量限,量效关系佳,可用于SM暴露的溯源检测。另外,成功应用磁珠法在体外染毒全血血浆样品中直接富集到了SM-DNA加合物。相对于全血样品,血浆中SM-DNA加合物表现出更高的浓度。基于实验室LC-MS系统,本论文成功构建了一种检测SM-DNA加合物的高效灵敏可靠的LC-MS/MS方法。该方法富集效率高,灵敏度高、重复性好,改善了SM-DNA加合物的液相分离与质谱响应,并且大幅缩减了前处理所需的时间,为SM中毒溯源分析提供了灵敏高效可靠的分析手段,为发现新DNA加合物、提高对芥子气毒理机制的认识奠定了基础。