【摘 要】
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酶是重要的生物催化剂,它们加速生物过程的大多数化学反应。荧光法具有较高的灵敏度,它经常被用作监测生物分子,和生物分子之间的相互作用。本论文利用新型的有机小分子荧光探针,结合一些纳米材料及生物大分子,发展了几种检测不同酶活性的新方法。主要内容如下:通过选择性分解二氧化锰纳米片（MnO2）建立了一种实时苝衍生物探针（P-4C+）荧光增强检测乙酰胆碱酯酶（ACh E）活性的新方法。P-4C+通过静电吸引
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酶是重要的生物催化剂,它们加速生物过程的大多数化学反应。荧光法具有较高的灵敏度,它经常被用作监测生物分子,和生物分子之间的相互作用。本论文利用新型的有机小分子荧光探针,结合一些纳米材料及生物大分子,发展了几种检测不同酶活性的新方法。主要内容如下:通过选择性分解二氧化锰纳米片（MnO2）建立了一种实时苝衍生物探针（P-4C+）荧光增强检测乙酰胆碱酯酶（ACh E）活性的新方法。P-4C+通过静电吸引相互作用吸附到MnO2纳米片的表面,P-4C+的荧光被MnO2纳米片有效地猝灭。ACh E催化底物水解生成具有还原性的巯基胆碱,MnO2纳米片被还原生成Mn2+。P-4C+从MnO2纳米片表面释放,荧光恢复。根据P-4C+荧光信号的变化,实现了对ACh E活性的检测。该方法具有良好的选择性和生物相容性,在ACh E活性相关的生物和医药领域具有潜在应用。基于聚乙烯亚胺保护的铜纳米簇（PEI-CuNCs）在MnO2纳米片表面的可控释放,构建了一种检测碱性磷酸酶（ALP）活性的新方法。带有正电荷的PEI-CuNCs通过静电吸引相互作用吸附到MnO2纳米片的表面,PEI-CuNCs的荧光被有效地猝灭。ALP可以催化底物水解生成具有还原性质的L-抗坏血酸。从而,MnO2纳米片被还原形成Mn2+,并导致片层结构的瓦解。吸附到MnO2纳米片表面的PEI-CuNCs释放,荧光恢复。PEI-CuNCs荧光信号的变化与ALP的浓度呈正相关。该方法简单、成本低;具有良好的灵敏度、选择性和生物相容性。通过控制四苯乙烯衍生物荧光探针（TPE-2+）的集聚,构建了一种新型的检测蛋白酶活性的方法。TPE-2+单体分子几乎没有荧光发射。肝素能够通过静电吸引相互作用诱导TPE-2+集聚,并产生较强的AIE荧光。组蛋白是一种碱性蛋白质,可以与肝素结合,从而使得TPE-2+与肝素分离。TPE-2+发生解集聚,同时AIE荧光发射消失。蛋白酶能够水解组蛋白生成短肽,从而减弱了肝素与组蛋白之间的结合。肝素重新诱导TPE-2+集聚,AIE荧光恢复。因此,我们通过控制TPE-2+“集聚-解集聚-集聚”过程,得到了荧光信号从无到有的变化。并且,通过荧光信号的变化,可以定量检测蛋白酶的活性。
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