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目的:本研究拟构建奥希替尼-黄芪甲苷共载脂质体（LPs-OSI/AS）,考察其形态、体外释放和包封性等。选用NCI-H1975细胞和耐OSI的NCI-H1975/OSIR细胞,在体外考察LPs-OSI/AS对细胞增殖作用的影响,以及细胞对载药脂质体的摄取情况,使用RTq PCR考察细胞内上皮细胞-间质转化（EMT,Epithelial–mesenchymal transition）相关基因的变化。同时构建裸鼠皮下肺癌移植瘤模型,考察LPs-OSI/AS的体内药效作用。方法:采用单因素筛选进行制剂的优化,以粒径、包封率和多分散系数（PDI,Polydispersity Index）等作为考察指标。体外采用噻唑兰（MTT,Dimethyl thiazolyl-2,5-diphenyltetrazolium）和克隆形成考察LPs-OSI/AS对NCI-H1975和NCI-H1975/OSIR细胞增殖的影响,荧光及流式考察细胞对LPs-OSI/AS的摄取作用,及设计Vimentin、TGFβ1和TGFβ2引物,采用RT-q PCR分析该制剂克服耐药细胞与抑制EMT的机制作用。同时在裸鼠体内建立NCI-H1975皮下移植瘤模型并从生长曲线、肿瘤体积曲线、肿瘤抑制率等方面评价LPs-OSI/AS的药效作用,及用免疫组化检测肿瘤组织中Ki-67的表达,评价LPs-OSI/AS对肿瘤增殖的影响。同时剖取裸鼠心、肝、脾、肺、肾进行HE染色,对药物的安全性进行初步评价。结果:分别建立了奥希替尼和黄芪甲苷的HPLC含测方法。奥希替尼在15.0000-240.0000μg,黄芪甲苷在12.8125-820.0000μg,线性关系良好。方法专属性强,精密度和重复性良好,稳定性高,回收率符合要求,表明建立的奥希替尼和黄芪甲苷的高效液相色谱方法结果准确可信。确定了LPs-OSI/AS的处方、制备工艺、质量评价、稳定性和体外释放。首先筛选出黄芪甲苷和奥希替尼的最佳药脂比,投药量分别为黄芪甲苷2 mg,奥希替尼1 mg。再选乙醇注入法和硫酸铵梯度法制备共载脂质体,确定选择蛋黄卵磷脂、胆固醇、PEG2000-DSPE制备LPs-OSI/AS,确定得到的最有处方比例为:蛋黄卵磷脂:胆固醇:PEG2000-DSPE=10:1:1。LPs-OSI/AS为具有淡蓝色乳光的纳米制剂。粒径为96.92±12.04 nm,PDI为0.28±0.01,黄芪甲苷包封率为89.74±6.53%,奥希替尼包封率为84.35±8.82%。LPs-OSI/AS具有合适的粒径分布、奥希替尼和黄芪甲苷都具有较高的包封率和良好的稳定性。此外,LPs-OSI/AS提高了黄芪甲苷的溶解度,为后续实验提供了基础。然后考察了LPs-OSI/AS在15000 rpm下离心30 min后,未见分层;放置一个月后,其粒径为121.60±11.3 nm;PDI为0.28±0.11,说明制备的LPs-OSI/AS稳定性好。透射电镜观察LPs-OSI/AS形态,发现其呈球形结构。差示热量扫描仪考察制备的共载脂质体和单载脂质体包封情况良好,未发生泄露。体外释放评价考察了LPsOSI/AS在PBS溶液中的释放行为。实验结果表明,LPs-OSI/AS具有明显的缓释作用,且没有突释的现象。体外考察结果显示以OSI剂量计在1.25-20.00μM浓度范围内,LPs-OSI/AS对NCIH1975和NCI-H1975/OSIR细胞的增殖抑制作用最强,表明LPs-OSI/AS对NCI-H1975和NCI-H1975/OSIR细胞具有较好的增殖抑制作用。观察NCI-H1975和NCIH1975/OSIR细胞对LPs-OSI/AS的摄取情况,发现NCI-H1975和NCI-H1975/OSIR细胞对共载脂质体的摄取强于游离香豆素,表明细胞对LPs-OSI/AS的摄取能力增强。RTq PCR实验实验结果显示,LPs-OSI/AS能降低Vimentin和TGFβ1、TGFβ2的表达,表明LPs-OSI/AS能抑制细胞EMT现象。体内实验的肿瘤生长曲线和肿瘤抑制率结果表明LPs-OSI/AS的抗肿瘤效果优于单一给药。LPs-OSI/AS给药组的裸鼠体重无显著性变化,提示其安全性良好。对剖取得肿瘤组织进行免疫组化分析发现,LPs-OSI/AS组阳性率明显低于联合用药组及AS和OSI组,表明LPs-OSI/AS显著抑制了肿瘤细胞得增殖。LPs-OSI/AS组肿瘤HE染色显示,肿瘤坏死面积更大,表明LPs-OSI/AS对肿瘤抑制作用最强,其结果与肿瘤抑制率一致。对各组心肝脾肺肾进行HE染色,与空白组相比,LPs-OSI/AS组并没有引起各器官明显病变。结论:本研究成功建立了黄芪甲苷和奥希替尼HPLC含测方法。构建了LPs-OSI/AS药物递送体系并对其进行表征,所制备的共载脂质体呈球状结构,稳定性良好,且具有较好的缓释效果。本研究对LPs-OSI/AS的体外考察发现其能显著抑制NCI-H1975和NCIH1975/OSIR细胞的增殖,增加细胞对脂质体的摄取及单药对EMT相关基因表达的调控作用。体内实验进一步证实LPs-OSI/AS对肿瘤生长的抑制,证明其具有良好的体内抗肿瘤活性作用,且安全性良好。