【摘 要】
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β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶(β-D-galactoside galactohydrolase, EC 3.2.1.23)通常被称为乳糖酶(Lactase),主要应用在生产低乳糖乳制品以及缓解乳糖吸收不良和乳糖不耐受的
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β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶(β-D-galactoside galactohydrolase, EC 3.2.1.23)通常被称为乳糖酶(Lactase),主要应用在生产低乳糖乳制品以及缓解乳糖吸收不良和乳糖不耐受的问题。但由于目前乳糖酶产量低,销售价格过高,应用成本昂贵,还未得到广泛推广。而基因工程技术的发展为乳糖酶提供了有效的途径。本实验主要构建了乳糖酶基因真核重组表达载体,在毕赤酵母中进行了表达,并对乳糖酶发酵的各种条件进行了摸索以及对发酵液进行了后期处理。实验结果表明:乳糖酶发酵的最佳pH为5.2,温度为30℃,甲醇最终流加速度控制在1.6～3.3之间,溶氧处于20～40%之间,最终测得乳糖酶的活力为7800U/mL。而发酵液最终选择截留分子量为20kD的超滤膜进行浓缩,这样,既不损失过多的蛋白,又会除去过多的杂质。
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